软肝化坚颗粒调节HSC细胞分泌胶原及相关细胞因子的研究.pdfVIP

会议交流其他 软肝化坚颗粒调节HSC细胞分泌胶原及相关细胞因子的研究 杨莉1，吕航宇2，刘玉珍1，侯军良1，戴二黑1 (1石家庄市第五医院检验科；2邯郸市中心医院) 的影响。方法通过灌胃制备软肝化坚颗粒及秋水仙碱药物血清，将HSC．6细胞分为3组，分别加入含软 肝化坚颗粒及秋水仙碱药物血清和正常小鼠血清的培养基，培养24h后，收集培养上清，采用ELISA及 放射免疫法检测I、llI型胶原及细胞因子转化生长因子$l(TGF．S1)、瘦素(Let)及血小板衍生生长 因子(PDGF)的含量。结果与空白对照组相比，秋水仙碱组和软肝化坚颗粒组培养上清中l型胶原、m 型胶原的含量均显著降低，细胞因子TGF-8 这可能此药抗纤维化作用机制之一； 一 一 l关键词l软肝化坚颗粒；肝纤维化；转化生长因子；肝星状细胞；胶原 肝纤维化的主要发病机理是肝组织中胶原合成与降解失衡所致的细胞外基质(extraceilularmatrix． 院治疗慢性肝病的经验方，具有健脾益气、活血化淤之功效，可以显著减轻炎症损伤和胶原生成。在我 们以往所进行的动物实验研究中，发现软肝化坚颗粒对促进肝纤维化形成的相关细胞因子如转化生长因 子8 探讨软肝化坚颗粒对HSC分泌I、III型胶原及相关细胞因子的调节作用．对软肝化坚颗粒抗纤维化的作 用机理做迸一步研究。 1材料和方法 中心购进。HSC．T6细胞株由美国FriedmanSL教授授权使用。 医院制剂室提供。秋水仙碱(阳性对照药)由通化百信药业有限公司生产。注射用生理盐水由石家庄 1含量的 四药有限公司生产。检测培养上清I型胶原、血小板衍生生长因子(PDGF)、LEP及TGF．B ELISA试剂盒由美国RD公司生产，检测III型胶原放射免疫试剂盒购自上海海岩医学生物技术有限公司。 BRL公司。 DMEM培养基、胎牛血清(FBS)、胰蛋白酶．EDTA溶液均购自美国Gibco 司产MK3型全自动酶标仪。 1．4药物血清制备方法小鼠按随机数字法分为3组，即软肝化坚颗粒组、秋水仙碱组和正常对照组． 分别给予软肝化坚颗粒(药物用量为l∥只／天，1次／天)，、秋水仙碱(药物用量为0．03mg／只／天， 醚麻醉，经下腔静脉无菌采血，置于无菌管中，凝固后离心，3000rpm，30min，取上清即所需药物血清。 存备用。 675 中华中医药学会第十五届内科肿胆病学术会议暨圜家巾医药管理腻专科专病协作组(肘病组、传染病组)会议 lmol／L 细胞用0．25％胰蛋白酶消化，以l：4传代，24h换液，72h再次传代。将处于对数生长期的HSC．6细胞 药物血清的培养基，分成3组，分别为10％软肝化坚颗粒组、10％秋水仙碱组和10％正常对照组，每组 5复孔，培养24h后，收集培养上清于．20℃保存备用。 1．6细胞因子的检测采用ELISA法测定培养上清中TGF．Sl、LEP、PDGF及I型胶原的含量；采 用放射免疫测定法检测培养上清中lII型胶原的含量，严格按说明书操作。 1．7统计学分析：统计学处理采用SPSSl3．0统计软件包。计量资料采用均数±标准差(±s)表示， 同一指标的组间比较采用方差分析，分析前进行方差齐性检验，方差齐时用LSD法(q检验)，若方差 不齐则用Tamhane’s法(q’检验)，P0．05表示有显著性差异。 2结果 2．1HSC．T6培养上清中I型、III型胶原含量的检测：与正常对照组相比，秋水仙碱组和软肝化坚颗 异无统计学意义。结果见表1。 表1：各组培养上清中I、III型胶原的含量 ★：与正常对照组相比，只O．05 2．2HSC培养上清中TGF．B1、瘦素和PDGF含量的检测：秋水仙碱组与正常对照组相比，培养上 清中TGF．B l、瘦