卵蛋白对致敏及哮喘小鼠树突状细胞功能的影响.pdfVIP

ClinicalJournalofChineseMedicine2009年 Vo1．(1)No．2 卵 蛋 白对 致 敏 及 哮 喘 小 鼠 树 突 状 细 胞 功 能 的 影 响 王 宇 张健华 张学兰 等 (1、苏州市第二人民医院新生儿科，江苏 苏州，2150022； 2、上海市第六人民医院儿科；3、苏州大学附属儿童医院检验中心) 中图分类号；R256．12文献标识码：A 文章编号：1674．7860(2009)11．0042．03 【摘 要】 目的：研究树突状细胞 (0C)在哮喘发病中的作用。方法：用卵蛋白 (OVA)腹腔注射和雾化吸 入复制致敏组和哮喘组小鼠模型，采用流式细胞技术测定脾脏 Dc的表达。结果：致敏组Dc的百分率明显高于对 照组，而哮喘组与对照组相比差别无统计意义。结论：致敏小鼠脾Dc表达明显增加，但哮喘小鼠Dc表达不明显。 【关键词 】哮喘；0C细胞 [Abstract] Objective：ToinvestigattheroleofspleenDCsinasthma．Methods：Miceweresensitizedand chanllengedwithovalguminbyabdominalinjectionandinhal~iontoestablishanallergicandasthmaticmodel， challengedgroup， flow cytometrewereusedtodeterminethepercentageofspleenDCs．Results：Thepercentageof ’ spleenDCsinsensitizedrgoupishigerthancontrolgroup．thecontrastbetweenchallengedandcontrolgrouphasno difference．Coclusions：TheexpressionofspleenDCsamongsensitizedishigerthancontrolrgoup，theconrtastbewteen challengedna dconrtolgrouphasnodifference． [KeyWords] Asthma；Mcrophage 支气管哮喘是 由多种细胞参与的慢性气道炎症， 椎处死以获取标本。哮喘组小鼠15只，致敏方法同前， 引起气道高反应性，导致可逆性气道阻塞性疾病 ，树 从经抗原注射后一周开始将小鼠置于密闭玻璃箱内， 突状细胞在哮喘的发病过程中起着重要的作用，DC 用 I％OVA雾化吸入 20分钟诱发哮喘，OVA吸入每 来源于骨髓前体细胞，经血液循环进入非淋巴组织， 日一次，第 5天吸入后的0．5～1小时处死以获取标本。 分化为未成熟的DC ，定居于上皮组织及除脑 以外的 对照组小鼠15只，予腹腔注射生理盐水 lml，次 日处 实质脏器的间质，成为对抗原具有很强摄取和加工能 死以获取标本。小鼠处死后，消毒，剪开腹部皮肤， 力的未成熟的DC ，在局部炎性物质和抗原的刺激下 取小鼠脾脏置于盛有不含小牛血清的1640培养液的 DC逐渐成熟，并进入局部淋巴结，在迁移的过程中， 平皿 中。洗去血迹，剪去脂肪及筋膜组织，于金属网 摄取和加工抗原的能力逐渐减弱，而抗原提呈能力逐 上研压，收集网下的细胞悬液，注入无菌离心管中。 渐增强。本实验通过卵蛋~I(OVA)腹腔注射和雾化吸 用 1640培养液洗两次并重新悬浮。将上述制备的脾脏 入，复制致敏和哮喘小鼠模型，采用流式细胞术测定 细胞悬液缓慢置于已配好的聚蔗糖一泛影葡胺分层液 脾脏DC的表达。探讨致敏部位DC的表达状况。 上 (比重 1．080)，离心 (2000r，20min)，吸取第二层 1 材料与方法 云雾状的低密度细胞，再经 1640培养液洗两次，并计 1．1试 剂 数。 卵蛋 白 (GradeV，SigmaChemicalCo)，1640培 1．4小鼠脾树突状细