用差异显示PCR法筛选与血管外膜细胞表型转化相关的基因.pdfVIP

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2017-09-02 发布于重庆
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用差异显示PCR法筛选与血管外膜细胞表型转化相关的基因.pdf

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生理学报，，（）： N# H ’(() ! + FID O FIE FID !#$ %’()*+*,)$ -).)$ 用差异显示#$% 法筛选与血管外膜细胞表型转化相关的基因孙爱军，高平进，刘建军，姬开达，朱鼎良! （上海第二医科大学附属瑞金医院上海市高血压研究所，上海’(((’D ）摘要：为筛选血管外膜成纤维细胞（，）与肌成纤维细胞（，）间表型转化有 6%;.$.$6 K$843861. ,P @93K$843861. QP 关的基因，实验建立了大鼠胸主动脉和两种细胞模型，用差异显示聚合酶链反应（）技术获得表达 ,P QP NN*G! 差异片段，对差异片段进行克隆和测序分析，并用定量G! 和:34.04; 83. 对差别显示结果进行验证。用反义核酸转染技术观察骨桥蛋白（，）对迁移的影响。结果表明，两种表型细胞存在明显的基因表达差 31.3-3;.$; R: ,P 异，其中一个在下调的差异片段与中脱氢酶亚单位（，）基因 QP C;A6;5 :,NS D :,NS 0943?;61 1787;$. D :D 高度同源。另一个在QP 上调的差异片段与R: 基因同源。上述差异表达结果被定量G! 及:34.04; 83. 证实。此外还有个表达序列标志（，）在中未查到同源序列。反义寡脱氧核苷酸可 F T-411 1U7;#*.6? JV/ C;A6;5 R: 抑制的迁移活动。结果提示，转化为可能与基因下调、上调及其它未知基因的表达改变有关。 ,P ,P QP :ND R: 应用反义技术适度抑制R: 表达在防治血管重塑中具有重要作用。关键词：血管外膜；成纤维细胞；肌成纤维细胞；差异显示聚合酶链反应；反义技术学科分类号：； W’X WF+I ’()*+,+-.*+/) /, 0()(1 2(3.*(’ */ -(33 45()/*64+- *2.)1+*+/) 76 ’+,,(2()*+.3 ’+143.6 .).361+1 ! VY: ,$*Z7;， C,R $;?*Z$;， [\Y Z$6;*Z7;， Z\ =6$*N6，