固定化葡萄糖异构酶及其生产果葡糖浆的研究.pdfVIP

垂耋量委?酾：!主氍i两譬确兰差I豸囊 固定化葡萄糖异构酶及其 生产果葡糖浆的研究 袁建国 李峰 徐军庆 段峰 杨丹 山东省食品发酵工业研究设计院 济南京鲁生物技术研究开发中心 【摘要】从海南岛等全国各地收集样品经过六年的分离筛选、诱变育种筛选出一支产葡萄糖异构酶 株生长条件粗放，发酵周期短，不易染菌，发酵液易过滤，胞外酶占9弼以上，酶热稳定性好。根据M1033-101 菌株的特点，用离子交换树脂作载体进行嗜热放线菌葡萄糖异构酶固定化的研究。通过实验证明，此固定 化方法易掌握，工艺简单，操作方便，载体可反复使用，得到的固定化酶机械强度好，保存期长，该固定 高果糖浆在国外是发展较快的一种新型甜昧 产品的反应发生和产品易精制，从而提高了产品质 剂。我国自1965年以来就开始了研究，曾用液酶量，降低了生产成本。因此，固定化葡萄糖异构酶 进行异构化试生产，但是由于产品质量差，成本高， 这一新技术的问世促进了果葡糖浆事业的飞跃发 无法工业化生产。因此，我国开始对固定化葡萄糖 展。 异构酶进行研究。 我院自1981年承担了山东省科委下达的 葡萄糖异构酶是水溶性酶，固定化葡萄糖异构 M1033嗜热放线菌固定化葡萄糖异构酶研制项目。 酶是指通过物理、化学的方法把这种酶固定在不溶 并先后承担了国家“六五”、。七五”固定化葡萄糖 性的固体载体上，使载体具有较高的酶活性。得到 异构酶的重大科技攻关项目。我们根据M1033．101 的固定化酶可以把底物葡萄糖部分的转化为果糖， 胞外酶高的特点，采用离子交换树脂作载体进行固 这种葡萄糖和果糖的混合糖浆称为果葡糖浆。由于 定化酶的研究。从不同类型的树脂中筛选出一种适 固定化酶有许多优点，如：酶可长期多次使用，工 合作该酶载体的树脂。中试结果表明：固定化酶方 业生产可连续化、自动化，易于控制，避免不利副 法易掌握，工艺简单，操作方便，载体可反复使用， ·305· 2007年全国发酵行业高峰论坛 所制得的固定化酶机械强度好，保存期限长。其固 2．菌种的稳定性 定化酶活力在18000-20000单位，克(干)，经多次经过较长时闻的保存试验证明M1033．101的 反应柱试验，每千克固定化酶可转化42％果葡糖浆 性能和酶活力都能重复出它中试鉴定的水平，因而 7—8吨。该固定化酶对发酵液总酶活的回收率为 是稳定的。 85％。 3。萤释蠹孽安全性 研究部分 清发酵成熟液经山东省药物检验所抗菌性试 一、莹种的筛选 验的检验，结果为阴性。清发酵液转化麓萄糖{!导到 嗜热菌有着非常显著的优点，在高温条件下， 的高果糖浆成品经山东省卫生防疫站慢性大白鼠 生长发育快，培养周期短，杂菌污染少，多数耐酸 毒性试验、大白鼠致畸试验，以及山东省劳动卫生 碱、有机溶剂、纯学交褴试裁等，有利于高温船工 职业病防浚研究所致突变性试验，结果势阴性。因 工艺和固定化，因此，近几年来国内外从事嗜热菌 此，成品离果糖浆卫生上是安全的。 研究豹报告日益增多。 4埋}莽条件 1．菌种的筛选 斜面：使用无机盐淀粉琼脂作培养基，温度 我们从全因14个省市采集了2847份样品，对45．50℃，相对湿度75．80％，培养3-4天。 ’ 产蘩萄糖异狗酶嗜热放