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高等教育 课程教育研究 从粘细菌中寻找活性物质的研究方案 崔道林 陈春丽 z (1．曲靖医学高等专科学校 微生物与免疫教研室 2．曲靖医学高等专科学校 生物化学教研室 云南 曲靖 655000) 摘【要】本文介绍了寻找生物活性物质的必要性和紧迫性，从粘细菌中寻找生物活性物质的优点，具体探讨了研究粘细菌活性 物质 的技术路线。 关【键词】粘细菌 生物 活性物质 【中图分类号】G64 文【献标识码】A 【文章编号]2095—3089(2014)03—0033—01 随着环境污染的加剧和人类生活方式的变化．心脑血管疾 综合文献中的方法．用玻棒平整的一头印土样，然后转印在 病、恶性肿瘤、糖尿病、老年性痴呆症等疾病 日益严重地威胁着 滤纸水琼脂平板的滤纸上 ．将接好土样的平板倒置放于30℃的 人类健康．仅病毒病平均每年就新增2—3种 长久以来抗茵素被 恒温箱中培养 7d左右就可在土样周围观察到粘状物 将粘状物 认为是治疗传染性疾病的神奇药物．然而近年来抗茵药物正在 转接到滤纸水琼脂平板的滤纸上培养。3d后．转接到滤纸上的粘 逐步丧失其神奇疗效 随着抗茵类药物的广泛使用．越来越多的 状物有明显的扩展，变厚。约7~10d后．可观察到子实体 出现。 病原茵产生了对一种甚至多种抗菌素的耐药性∞人类迫切需要 2．2粘细菌的液体培养与发酵产物的提取 寻找新的、特效的药物来治疗这些疾病 人们都纷纷把 目光投向 从菌种的平板上挑出子实体接种到液体培养基．摇床培养 了生物活性物质，所谓生物活性物质．是指来 自生物体 内的对生 3d作为种子液。以10％的接种量接种到液体培养基 ，于30℃， 命现象具有影响的微量或少量物质．主要包括药用物质、生物信 160rpm培养2d。然后加入2％(v／v)高温灭茵后的SIPI28非极 息物质、毒素等生物体 内的天然产物 此外．A．411~希望利用生 性大孔吸附树脂．继续在摇床中培养5d。 物活性物质开发 出增进健康、预防疾病的营养食品、保健食品， 2．3发酵产物粗提取物的薄层层析分离 有些生物活性物质还可用于化妆品中．有的可制成特殊的生物 粗提物的分离采用硅胶薄层层析 层析板用薄层层析硅胶 功能材料．使得生物活性活性物质成了研究热点 已经被人类开 H(60型)制备，采用展层液(石油醚：丙酮=3：1)上行法展层。层析 发的微生物资源如小单孢茵、放线茵和粘细茵等．在粘细菌中发 后，在紫外灯下观察。将点刮下，用甲醇洗脱。lO000rpm 离心，收 现的生物活性物质的数量，仅次于放线茵，真菌和芽孢杆菌，而 集上清．挥发甲醇．得到分离物。 且从放线茵等微生物中筛选新生物活性物质的重复几率越来越 2．4进行ESL—MS分析 高．而粘细菌在这方面具有独特的优势。就 目前情况看．粘细菌 电喷雾质谱 E(SI—MS)已发展成为一种通用的质谱技术．它 中55％的菌株可产生生物活性物质．而溶纤维素群粘细菌甚至 是通过测定样品离子的质荷比fm／z1来进行成分和结构分析的方 高达95％ 这为新结构或新作用机制生物活性物质的筛选提供 法．ESI—MS从一开始就成为了药学和生物医学研究领域重要的 了很好的一类微生物资源 标志性工具．广泛地使用在组合化合物库的高通量筛选、杂质分 1．粘细菌产生生物活性物质的优点 析、药代动力学研究和代谢产物的确认，以及蛋白质结构特征的 从已有的文献看．粘细菌产生的生物活性物质主要表现以 表达等各方面应用领域 下几个方面的特点：①种类多。包括芳香族、杂环类、醌类、大环 2．5抗茵谱 测定 类、聚醚类、多烯类、肽类化合物等，这一点与放线茵十分相似。 将通过薄层层析得到的分离物，用二甲亚砜溶解。将 已灭茵 1994年Schumlner等人还分离到一种合硼生物活性物质 ②结 的滤纸片放入浸泡 1h．取出后晾干备用。接着将各种待测茵或 构新。目前分离到的60多种基本结构中．仅有3种是在其他微 孢子悬