松花江多江段微生物降解硝基苯研究.pdfVIP

第五屑环境模拟与污染控制学术研讨会论文集 松花江多江段微生物降解硝基苯研究 李宗来李栋张晶杨敏 中国科学院生态环境研究中心环境水质学国家重点实验室 研究背景：2005年l 1月13日，吉林石化发生爆炸，超过100吨的硝基苯进入松花江， 影响了下游城市的饮用水供应，引起了国内外的广泛关注。一般来讲，硝基苯难以被生 物降解，非驯化的菌种是不可能将硝基苯作为唯一碳源的，或者其降解仅仅发生在培养 初期。但松花江长期有硝基苯的污染，其微生物在一定程度上已经被驯化，对硝基苯具 有一定的降解能力，温度对硝基苯的降解影响很大。为了评价低温下微生物降解对松花 江硝基苯通量衰减的贡献进行了一系列模拟实验，同时也利用分子生态学方法对不同江 段的微生物的群落组成和降解功能基因进行了比较。 实验方法：样品来自松花江的沿线31个断面的水和沉积物。吉林段水和沉积物微生物 荡，减少挥发，三个平行样，设置灭菌对照。低温下厌氧降解在一系列22ml带硅胶垫 样品瓶中加入底泥，加入对应的水装满，在25℃预培养3天让冷冻长时间的微生物恢复 活力，再加入硝基苯大约0．1mg，Parafilm膜密封样品瓶后分组放入装有厌氧产气袋多 层自封袋中，10℃恒温静置培恭每天轻晃混匀。对吉林段沉积物中微生物进行了DGGE 和16sRNA克隆文库分析。 结果和讨论：降解能力比较见图1．2，底泥微生物中，丰满和三江口降解活性出现晚， 速率慢，九站降解活性出现早，速率快，推测是由于硝基苯在位于排放口下游的九站有 较多的沉降滞留，导致其微生物被驯化，降解能力强，而上游的丰满和更远下游的三江 口微生物需要较长时间的适应。水体微生物中，丰满的最慢，十号线降解最快，九站、 三江口降解能力相仿，介于丰满和十号线之问。这可能是由于十号线断面紧靠排放口， 其水体中曾存在高浓度的硝基苯，一部分微生物被驯化而具有较强的降解硝基苯的能 力，而随着水的流动，硝基苯慢慢出现沉降，因此紧下游的九站断面的底泥降解能力最 好，而更远的三江口，没有出现明显的沉降。由于温度太低，抑制了微生物活性， 图3 江水的lO℃的实际降解曲线和参照曲线基本平行，出现较稳定的差值，因此认为也不是 生物降解所致，此时硝基苯的衰减途径为挥发。图4底泥的10℃厌氧降解为九站十 号线三江151呼兰河口下临江达连河丰满。九站的降解速率最快的原因估计和好氧 相似，底泥微生物被驯化。除了丰满为上游参照最慢外，其他基本和上下游次序一样， 这也表明了底泥微生物驯化程度和距排放口的距离呈现正相关。也证实了通常情况下硝 基苯厌氧降解比好氧降解更容易发生。降解过程中检测到了C230开环基因的存在，中 间产物亚硝基苯和苯胺被检测出。图5DGGE结果表面排污点下游的十号线、九站、三 江口比较相似，且受排污影响明显。通过分析克隆结果可以看出(表1)，上游没有被污 染的丰满断面OTU数目最大，同时多样性指数最高，覆盖率最低，表明丰满群落多样 性最高。十号线点由于离上游较近，所以多样性仍然较高，其他受硝基苯污染的点多样 性都较低。 第105页 第jL黼环境模{lj与污染拄制学术研讨会论文集 ————————————————一———————————————————————————————————一 i；E；l … ～^Th_1h■ 图l吉林段底泥微生物降解硝基苯能力比较 图2吉林段江水微生物降解硝基苯能力比城 F精C 36 玎 21 23 266 0Bs o引 #HmD 33 1 4 13 1 4 2．22 084 。78 十q‰S1 37 22 22 23 2．57 083 0．59 ^％s2 34 1 4 1 3 14