基于纳米材料电化学免疫传感器检测禽呼肠孤病毒研究论文.pdfVIP

中国畜牧兽医学会畜牧兽医生物技术学分会暨中国免疫学会兽医免疫分会第十次学术研讨会论文集 基于纳米材料电化学免疫传感器检测禽呼肠孤病毒研究 黄娇玲，谢芝勋，谢丽基，滕丽琼，黄 莉，刘加波，庞耀珊，邓显文，谢志勤，范 晴，罗思思 (广西壮族自治区兽医研究所广西畜禽疫苗新技术重点实验室。广西南宁530001) 摘要：构建一种用于检测禽呼肠孤病毒(ARV)fgJ新型电化学免疫传感器。制备石墨烯．甲壳胺．金纳米粒子 (G-Chi-AU)纳米复合物用于修饰金电极作为传感器平台用于固定待测样品，同时制备石墨烯．甲壳胺一银纳米粒 所建立的电化学免疫传感器ARV的检测敏感度为101。5 特异性。本研究所建立的传感器特异性高，敏感性好，为禽呼肠孤病毒提供一种新的快速检测诊断技术。 关键词：石墨烯；电化学免疫传感器；金纳米粒子；银纳米粒子；禽呼肠孤病毒 禽呼肠孤病毒(avianreovirus，ARV)是呼肠孤病床医学诊断110J等领域。生物传感器技术具有操作简 毒科，正呼肠孤病毒属的成员。各种禽类包括鸡、 便快速和反应灵敏特异等优点。石墨烯是以碳原子 火鸡、鸭、鹅及其它野鸟都可因感染ARV而发病， 紧密堆积而成二维特殊结构的碳材料，它具有较大 临床病症表现为病毒性关节炎、呼吸道疾病、肠道 的比表面积和良好的导电性，是应用于免疫传感器 疾病、矮小综合症和免疫抑制等多种疾病Il-3l。现代研究的优质潜力材料…钔。因此，本项研究选用甲 养禽业因ARV感染而引发的这些临床病症严重影 壳胺修饰石墨烯，制成石墨烯．甲壳胺．金纳米粒 响鸡群健康和经济效益。因此，为有效防控ARV 爆发流行，建立一种特异性强、敏感度高及快速的 新型ARV检测方法是非常必要的。目前检测ARV速、灵敏的电化学免疫传感器技术检测ARV。电化 的主要方法有ELISA、RT．PCR、核酸探针、实时荧学免疫传感器是将免疫检测技术与电化学传感技术 光定量PCR∽I。虽然这些方法都具有较高的特异性相结合，构建而成的一种新型生物传感器。它同时 和敏感性，但各有不足之处，如ELISA耗时较长，具备了免疫测定法的高特异性和电化学传感技术的 RT．PCR技术复杂且电泳时需要接触EB等有害物高敏感性，可用于痕量病毒的分析检测。本项研究 质，核酸探针技术操作较繁琐，实时荧光定量PCR 首次提出并应用以G—Chi—AuNPs作为传感器平台， 所需仪器和试剂昂贵，这些不足或缺欠影响了它们 的实际应用。近年来，一项新的生物传感器技术已 ARV检测提供了一种特异、敏感和快速的新型检测 经成功应用于环境成分分析f8I、食品工业质检19I和临诊断方法，对ARV有效防控具有重要意义。 1222003-2、1304523) 作者简介：黄娇玲(1987-)．女，壮族，广西大新人，硕士，主要从事电化学生物传感器的研究． +通信作者：E·mail：xiezhixun@126．gore 一75— 中国畜牧兽医学会畜牧兽医生物技术学分会暨中国免疫学会兽医免疫分会第十次学术研讨会论文集 1 材料和方法 洗涤5次，得到G．Chi．AgNPs纳米复合物。 1．5 移取1mL 试验于2012年10月至2013年4月在广西壮族 1 wt％BSA溶液，在4C冰箱 自治区兽医研究所生物技术室进行。 ARV．MAb，200恤L 1．1 000 病毒株和抗体禽呼肠孤病毒S1133标准株购 内反应过夜，用二次去离子水反复离心(8 r／min， 10 自中国兽医药品监察所；灭活H5N1亚型禽流感病 mm)洗涤3次。 毒由中国农业科学院哈尔滨兽医研究所提供；H3N61．6 传感器的制备及检测将金电极(GE，中=3mm)