保存卵巢生理盐水温度下降对猪卵母细胞体外成熟影响.pdfVIP

维普资讯 保存 巢生理盐水温度的下降对猪卯母 细胞体外成熟的影响 蔡 元 --，张兆旺。，田见晖 ，成文敏 ，王金勇 ’_ (1．重庆市畜牧科学研究院，重庆 荣昌 402460； 2．重庆市养猪工程技术研究中心，重庆 荣昌 402460； 3．甘肃农业大学动物科技学院，甘肃 兰州 730070； 4．中国农业大学动物科技学院，北京 100094) 中图分类号 S814．8 文献标识码 A 文章编号 1672—9692(2005)07—0017一O2 [摘 要]本试验研究了在 37～38．5℃生理盐水中保存猪卵巢，卵巢运回实验室后生理盐水温度对 猪卵母细胞体外成熟的影响。37～38．5℃的生理盐水中保存猪卵巢，运回实验室后，当温度下降为31℃、 32℃、33℃、34℃及 36℃时卵巢上抽取卵母细胞的成熟率分别为 24．86±7．31％、21．34±5．12％、 28．32±7．49％、21．14±4．82％和 17．70±2．27％，淘汰率分别为 53．42±12．10％、48．05±21．04％、 43．93±12．77％、58．19±6．82％和 62．06±12．03％，各组间差异不显著。结果表明：在 37～38．5℃ 的生理盐水下保存猪卵巢，运回实验室后，当温度下降到 31～36℃时对卵母细胞的成熟没有显著影响。 [关键词]猪；卵母细胞；保存温度；体外成熟 保存卵巢生理盐水的温度是影响哺乳动物卵母细胞体 集的猪卵巢都是从偏远 的屠宰场获得 的，再加上气温等条 外成熟的影响因素之一，有关采集卵巢所用生理盐水温度 件的影响，待卵巢取回时，一般温度都要降低 4～5℃，因 的报道很多，从 20℃、25 、30℃一直到37℃、39oCt1， 此，在采集卵巢时生理盐水的温度都要根据当天气温做适 几乎每一个温度都被一些实验室所采用。Prather181曾报道 当调整，以防止温度下降幅度过大，影响卵母细胞成熟效 25℃和 39℃的生理盐水温度对卵母细胞发育潜力有影响。 果。但是到 目前为止，还未见有关生理盐水温度的下降对 刑风英 O【l报‘道 ，在 22℃、30℃、37℃、38．5Co、40Co下保 猪卵母细胞体外成熟影响的报道 。本试验 的主要 目的是研 存卵巢，随着温度的升高，卵母细胞的体外成熟、激活后 究在37～38．5℃生理盐水中保存猪卵巢 ，卵巢运回实验室后 的卵裂率和囊胚率明显下降，37℃的生理盐水保存猪卵巢 生理盐水温度的下降对猪卵母细胞体外成熟的影响。 效果最佳。在取卵巢前应先预热生理盐水，但是由于所采 1 材料和方法 1．1 材料 [收稿日期]2005—04-14 [作者简介]蔡元 (19760，男，硕士，主要从事胚胎生物技术研究。 1．1．1 卵巢来源 屠宰场收集的废弃卵巢。 [基金项 目]北京市科委重点资助项 目 mO22O2oo6O420)，北京市科技新星 1．1．2 试剂来源及成熟液组成 TCM199购 自Gibco， 计划资助项 目 0IO2082O63O120)和重庆市 “十五”良种创新工程项 目资助 胎牛血清 B 购 自Hyclone，NaC1为国产试剂，其余试 口848)。 4 讨论 有表达 ，另外 2种蛋白HSP70—2和 HSP70t是在生殖细胞 HSP70有着许多重要的生物学功能，如帮助其他蛋 白 中特异表达 。HSP70—2mRNA在减数分裂阶段 的细线期、 质折叠、转运、组装成复合物等。HSP70能在体内或体外 偶线期精母细胞中表达，在粗线期精母细胞中高度表达， 刺激因素的诱导下表达，笔者 曾对经热应激处理的肉鸡的 与本试验中的结果一致。HSP70—2出现于曲细精管 I～Ⅳ 心脏、肝脏、肾、脑及法氏囊等组织中HSP70的表达及定 期的早期初级