双向电泳技术在植物应答非生物胁迫蛋白质组学研究中的应用.pdfVIP

安徽农业科学，JournalofAnhuiAgri．Sci．2010，38(3)：1135—1138 责任编辑 胡俭胜 责任校对 卢瑶 双 向电泳技术在植物应答非生物胁迫蛋 白质组学研究中的应用 程思思，乙弓I，张习敏，马琛 (贵卅币范大学生命科学学院，贵州贵阳550001) 摘要 介绍了双向电泳技术(2．DE)的基本概况及其在植物应答非生物胁迫蛋白质组学研究中的应用，并对今后的发展进行了展望。 关键词 双向电泳；蛋白质组学；非生物胁迫 中图分类号 $31i 文献标识码 A 文章编号 0517—6611(2om)o3一O1135一o4 ApplicationofTwo—dimensionalElectrophoresisTechnologyinPlantResistancetoAbioticStressProteomicalResearch CHENGSi-sietal (SchoolofLifeSciences，GuizhouNormalUniversity，Guiyang，Guizhou550001) Abstract Thegeneralsituationoftwo—dimensionaleleetrophoresis(2-DE)wasintroducedaswellasitsapplicationinplantresistancetoabi— oticstressproteomiealresearch．Finally，thedevelopmentof2-DE inthefuturewasforecasted． 。 Keywords Two—dimensionaleleetrophoresis；Proteomics；Abioticstress 植物在生长发育过程中会遭遇高温、低温、干旱和高盐 术的完善，IPG逐步替代了CA，发展成 IPG—DALT(固相 pH 等各种非生物逆境胁迫。植物感受这些逆境信号后通过信 梯度 一道尔顿) 。 号转导过程调节细胞内抗逆性相关蛋 白的表达，进而调整 自 目前，随着蛋白质组研究的不断发展，双向电泳技术凭 身的生理状态或形态来提高其对非生物逆境的耐受能力 j。 着其高通量、高灵敏度 、高分辨率 、重复性好、便于计算机进 目前已有许多通过筛选 、鉴定植物抗逆性基因以提高植物抗 行图像分析处理等其他蛋白质分离技术所无法比拟的优势， 逆性研究的报道，都是从细胞 mRNA的角度来考虑的。但实 已经成为蛋白质组学研究领域 中不可或缺的实用技术之一， 际上蛋 白质复杂的翻译后修饰 、蛋 白质的亚细胞定位或迁 越来越受到大家的关注。 移 、蛋白质 一蛋白质相互作用等几乎无法从mRNA水平来判 2 双向电泳技术在植物应答非生物胁迫蛋白质组学研究中 断 。而通过蛋白质组学的研究 ，能够更好的反映植物应答 的应用 非生物胁迫中相关蛋白在时间、空间、数量 、活性等方面的差 2．1 在植物应答高温胁迫蛋 白质组学研究中的应用 植 异 。因此，对于植物应答非生物胁迫蛋白质组学的研究及双 物体在受到高温逆境刺激后可诱导大量热休克蛋白的表达， 向电泳技术的应用越来越受到人们的关注。 这些蛋白是植物对逆境胁迫短期适应的必需组成成分，对减 1 双向电泳 (2D·E)技术概况 轻高温胁迫引起的伤害有很大的作用。YvesMeyer和 Yvette 双向电泳是通过2次凝胶电泳达到分离蛋 白质群的技 Chartier对烟草进行热激处理后 ，通过 2-DE技术分析其叶肉 术 ，第一向为等电聚焦 (IEF)，即根据蛋白质的等电点差异将 原生质体蛋 白质组，发现某些蛋白的合成几乎不受影响，而 蛋 白质分离 ；第二向为十二烷基硫酸钠 一聚丙烯酰胺凝胶电 某些在25oC被检测出的蛋白质在热激处理后合成量明显减 泳 (SDS—PAGE)，即根据蛋白质的分子量差异将蛋白质分离。 少 ，另外还新诱导出 17个特异性热激蛋白 。M．Krishnan 双向电泳分离得到的每个斑点都对应着样本中的 1种蛋 白， 等通过2-DE技术分析 了热激下玉米线粒体蛋 白质组的变 是唯一能将样本中 10