免疫组化染色防止脱片几点改进.pdfVIP

实用癌症杂志2010年 1月第25卷第 1盟 —ThePractica—lJournalofC—an—cer l， I ，t · 73 · · 经验 交流 · 免疫组化染色防止脱片几点改进 林 蓁 田 甜 关键词 ：免疫组化 ；防止 ；脱片 防尘晾干备用?加酶洗衣粉 中含有表面活性剂能减弱污渍附着 中图分类号 ：R730．45 文献标识码 ：B 力；高活性生物酶制剂等有效地提高和改善清洁性能，可以大大 文章编号：1001—5930(2010)01-0073~l 增强清沽剂对油脂及特殊和难洗污渍的洗净能力。重铬酸钾硫 酸清沽剂具有强氧化性与强腐蚀性，可将玻片上较难除去的污 免疫组化染色存肿瘤诊断及肿瘤预后推断中具有重要意 物及霉菌等清除，操作需谨慎注意安全，其 巾含有的六价铬离子 义。免疫组化染色，组织切片必须经过高温、高压，或酶消化及 易被玻璃吸附，需用大量清水冲洗方能清除 多次洗涤等步骤，在载玻片上因黏附不牢易引起脱片，这样既浪 3 载玻片包被 费试剂和人力，又影响诊断质最，有些小标本脱落后甚至无法弥 补。冈此 ，防止脱片是整个免疫组化染色Ift~,N进行的关键环节 为 r防止脱片，通常在切片前在载玻片上包被防脱剂 。载 之一。实践证明，免疫组化染色组织切片脱落，受许多因素影 玻片包被至关重要，玻片清沽、防脱剂浓度，晾片温度等条件都 影响载玻片包被质量 ．多聚赖氨酸溶液 (PLI~)由于多聚赖氨 响，如载玻片清洁、防脱片剂包被、蜡块选择 、切片厚薄 、烤片适 酸分子可和组织切片问氨基酸佗点结合，从而使组织切片牢固 度、抗原修复等。为此，我们经过多年摸索改进不足，优化切片 质量 ，总结 r以下JL点经验 ，现介绍如下 地黏附于载玻片上是较好 的防脱刹 。即使经较长时间，多步骤 反复洗涤也不易脱片．．我们将 0．o1％PLLS均匀滴加包被存洁 1 组织处理与蜡块选择 净载玻片，37℃～40oc烤f，不要用较高温度烤，易冈静 电使其 组织处理包括组织固定及时、取材规范、脱水充分 、透 明完 表面吸附细尘等杂质，降低 与组织切片吸附结合能力。将包被 全、浸蜡适度等。标本及时用 10％巾性缓冲甲醛液陶定，用于 好的载玻片重复再包被一次。两次包被增加包被效果，提高切 免疫组化染色组织块 1．2cm×1．2CHI×0．2(．fll为好 取材过 片质量：处理好防脱载玻片防潮、防尘保存 大过厚，组织同定不及时，组织抗原弥散、丢失，造成外周部分周 4 切片质量 定较好，染色定位清晰，而巾央部分背景模糊，染色定位不清，同 时影响脱水及浸蜡，切片困难，不完令或不成形 按规范化操 切片的厚度一般不超过 3txm，组织切片过厚 载玻片黏附 作，制作}H优质蜡块 ，再根据 HE切片观察结果，选择所需蜡块： 不牢，可适当切至2 m。特别是一些较硬如宫颈组织及脂肪含 蜡块选择应减少选择含过多脂肪 、挤压变形、较硬的组织蜡块， 量较多的乳腺组织，经过高温 、高压修复处理容易脱片，烤片应 坏死、脂肪过多、钙化、烧灼等较硬组织在抗原修复等操作中易 当充分。摊片时必须选择平整、无皱折、无刀痕、无气泡、无破损 引起组织切片脱片现象。 的组织薄片贴存防脱载玻片 f。有折叠、有气泡组织局部未牢