间歇性高糖对NRK-52E细胞抗氧化能力作用研究.pdfVIP

· 1O6 · 山西医药杂志 1o年2月第 39卷第 2期上半月 ShanxiMedJ，February2010，Vol39，No．2theFirst 问歇性高糖对 NRK一52E细胞抗氧化能力作用研究 广西医科大学第九 附属 医院(536O00) 梁华晟 钟宇华 【摘 要】 目的 探讨间歇性高糖抑制大鼠肾小管导管上皮细胞株 NRK一52E抗氧化能力 。方法 实验开 始 72h后 ，Westernblot检测空白组、正常葡萄糖组 (5mmol／I葡萄糖)、高糖干预组 (25nmol／I葡萄糖)、间歇性 高糖干预组 (5mmol／I葡萄糖与 25mmol／l葡萄糖交替)中氧化物歧化酶一l(SOD-1)、还原型辅酶 II(NADPH) 在NRK一52E细胞表达 。一氧化氮合酶(eNOS)试剂盒应用液闪仪测定 3[H]的放射强度 ，活性氧 (ROS)含量应用 CM2H2DCFDA试剂盒检测 。结果 高浓度葡萄糖及 间歇性高糖均下调 s()13-1及 NADPH表达 ，而提高 ROS 含量，间歇性高糖作用更显著。问歇性高糖 eNOS含量低于持续性高糖组。结论 间歇性高糖抑制肾小管导管 上皮细胞抗氧化能力显著 。 【关键词】 间歇性高糖 ； 抗氧化应激 ； NRK一52E细胞 Effectoffluctuatinghighglucoseon inhibition ofanti～oxidativestressinNRK-52E cellline LJANG H ua—sheng， ZHONGY —hua．T PNinthAfjiliatedHospital，GuangxiMedicalUniversity，Beihai536000，China [Abstract] Objective Tostudywhetherfluctuatinghighglucosehadinhibitedanti—oxidativestressinNRK-52E cellline．Methods Westernblotincontrolgroup(0mmol／Iglucose)，nOrlTlalglucosegroup(5mmol／Iglucose)，high glucosegroup(25mmol／Lglucose)，andfluctuatinghighglucosegroup(5mmol／Iglucose／25mmol／Iglucose)had carriedout．ThenN()SassaykitwasusedtomeasuretheactivityofeNOS，ROSweredetectedbyCM2H2DCFDA after 72h．Results TheexpressionofSOD-1andNADPH weredown-regulatedbyhyperglycemiaandfluctuatinghighglu— cose．FluctuatinghighglucosealsocouldincreasemoreROSthanhighglucose．ThelevelofeNOSinfluctuatinghigh glucosewaslowerthanthatofhighglucose．Conclusion Fluctuatinghighglucosecouldinhibitanti～oxidativestressin NRK一52E eellIine． [Keywords] Fluctuatinghighglucose； Anti—oxidativestress； NRK一52Eceu 本实验将观察不同条件葡萄糖状态下大 鼠肾 2h)及 25mmol／I的DMEM培养基(培养 3h)交替干预 ， 小管导管上皮细胞株 NRK一52E中抗氧化指标氧 每天重复 3次，夜间维持在 5mmol／I葡萄糖过夜。所有 分组均在 37℃，5 COz条件下培养 3d。 化物歧化酶一1(SO)【_1)、还原型辅酶 Ⅱ(NADPH) 1．3 We