溴百里酚蓝与牛血清白蛋白的相互作用研究.pdfVIP

第 22卷第 1期 化 学 研 究 与 应 用 Vo1．22。No．I 2010年 1月 ChemicalResearchandApplication Jan．，2010 文章编号：1004—1656(2010)01-0018-06 溴百里酚蓝与牛血清 白蛋 白的相互作用研究 周享春 ，颜 昌琪 ，颜承农 (长江大学化学与环境工程学院，湖北 荆州 434023) 摘要：在模拟动物体生理条件和不同温度下，用荧光光谱和紫外．可见吸收光谱法研究 了溴百里酚蓝 (BTB)与 牛血清 白蛋白(BSA)结合反应的光谱行为。用Stem．Volmer和Lineweaver—Burk方程分别处理试验数据，发现 BSA与 BTB发生反应生成了新的复合物，属于静态荧光猝灭。求出了反应时复合物的形成常数墨 (2．792X 10’L·otol)、热力学参数 (△ =．20．24kJ·otol～，AS。=37．22J·K～，Ac。=．31．25kJ·mol)与结合位 点数(1．1578)。根据Ffirster偶极-偶极非辐射能量转移理论计算出结合位置距离212位色氨酸残基2．60rim。 证明二者主要靠静电作用力结合。同时用同步荧光光谱和三维荧光光谱法探讨了BTB对 BSA构象的影响。 表明BTB使色氨酸残基所处微环境的极性减弱、疏水作用增强 ，为阐明BTB的染色机理、毒理效应和生物学 效应提供重要信息。 关键词 ：溴百里酚蓝；牛血清白蛋白；荧光猝灭光谱；三维荧光光谱；热力学参数 中图分类号 ：0629．73 文献标识码：A Studyontheinteractionofbromothymolblueandbovineserum albumin ZHOU Xiang-chun ‘，YANChang-qi，YAN Cheng-nong (CollegeofChemistryandEnvironmentalEngineering。YnagtzeUniversity，Jingzhou434023，China) Abstract：Undersimulatedphysiologicalconditionsofanimalsandatvarioustemperatures．tIlebindingreactionofbromothymolblue (BTB)tobovine~：rnm albumin (BSA)wasstudiedbyfluorescencespectrumw~andultra-violetspectrum spectroscopy．The fluorescencequenchingdatawereanalyzde accordingtoStern-Volmerequationand Lineweaver—Burkdouble-rceiprocalequation． Studieshaveshown：BSA hadreactedwithBTBandformde acertainnewcompound，thequenchingbelongedtostaticfluorescence quenching．Theformationconstnatsofthecompound (2．792X10L·otol-I．)，thethemrodynamicparameters(AH。=-20．24kJ ·otol～，AS。=37．22J·K～，AG。=-31．25．o9kJ·otol)nadhtenumberofbindingsites(1．1578)wereobtained．Basedonhte Ffirster’Stheoryofnon-radiationenergytransfer，htedistnacebetweenbindinglocalityandtryptophna residue-212wasP．．60nm．It showsthatthebindingpowerbetweenthem ismainlytheelectrostaticactingforce．TheeffectofBT