HPLC法测定LDK胶囊中的L-精氨酸.pdfVIP

’ 版 第36卷第 1期 J 1 西 南民族大学学报 自然 学 Jan．201o oumalofSouthw ityfo ． 1 … … … estUnivers rNationalitiesNatura1ScienceEdition 文章编号：1003．2843(2010)01．0103．03 HPLC法测定LDK胶囊中的L一精氨酸 许婧，毛羽，杜朗宇，李艳芬，刘小艺，王萍 (西南民族大学少数民族药物研究所，四川成都 610041) 摘 要：目的：测定LDK胶囊中的L．精氨酸．方法 采用RP．HPLC法，C18色谱柱，乙腈-醋酸盐缓冲液(14：86)为流动 相，流速 1．0mLra·in～，检测波长 200nm，柱温为室温．结果 L-精氨酸在 1．002gg一10．02gg范围内线性关系良好， r=0．9998．平均加样回收率为 92．38％，RSD=I．31％．结论 该方法简便，准确，重复性好，可作为LDK胶囊中L．精氨酸的 含量测定和质量控制方法． 关键词：LDK胶囊：L．精氨酸；高效液相色谱法 中图分类号：R284 文献标识码：A LDK胶囊是由人参、黄芪、俄色茶等组成的复方制剂，经动物功能和人体试食试验证明，具有辅助耐缺氧， 抗疲劳的功效． 本复方富含游离精氨酸，据文献报道，L．精氨酸可以改善运动能力，提高对缺氧的耐受力J【J．试验通过模拟 缺氧环境，对小白鼠灌胃L一精氨酸溶液，结果显示灌胃L一精氨酸组减压耐缺氧和常压耐缺氧时间比空白组明显 延长；肺组织切片显示L．精氨酸组血管明显舒张，耐缺氧效果显著2【J．人体在某些生理、病理状态下，也会处于 缺氧的状态，提高缺氧耐受力对某些特定人群有现实意义3【】． 文献报道常用的L．精氨酸的检测方法有坂口试剂法4【1、电化学法 J、化学发光法o【J、氨基酸分析仪测定法和 高效液相色谱法7【J．本文采用RP．HPLC及反相柱PhenomenorLunaC18(250mm~4．6ram，5pm)定量分析LDK胶囊中 L精氨酸，此方法比文献报道中的柱前衍生化法 7【]或HPLC--ELSD的梯度洗脱检测8【】更快速简便，样品不需衍生 化可直接进样，不受前体氨基酸及其他肽类物质干扰，不用梯度洗脱，能在较短的时间内达到分离 目的，适用于 从复杂体系中快速检测游离L．精氨酸的含量． 1 实验部分 1．1 仪器与试药 2695高效液相色谱仪系统(美国Waters)，电子分析天平(梅特勒一托利多仪器(上海)有限公司)，KQ．250B型超声波 清洗器(昆山市超声仪器有限公司)．L．精氨酸对照品(自制，产物经HPLC检测纯度96％以上)；LDK胶囊(自制)； 乙腈为色谱纯；水为重蒸水；其余试剂为分析纯． 1．2 方法与结果 1．2．1 色谱条件 色谱柱为色谱柱为PhenomenorLunaC18(250mmx4．6ram，5gm)；流动相为乙腈 ．醋酸盐缓冲液(14：86)； 流速 1．0mLm·in～；检测波长200nm；柱温25~C；进样量5pL．理论塔板数按L．精氨酸计为5．628x10． 1．2．2 溶液的制备 精密称取L．精氨酸0．1002g，用重蒸水定容于lOOmL容量瓶中，摇匀得1．002mgm·L的对照品溶液．取LDK 胶囊 O．1004g置于锥形瓶中，加一定量重蒸水，超声提取30rain，过滤，滤液定容于 100mL容量瓶中，摇匀得供 收稿 日期：2009．09．21 联系作者：毛羽(1962-)，男，西南民族大学少数民族药物研究所副教授，博士 104 西南民族大学学报 ·自然科学版 第36卷 试品溶液．取不含L一精氨酸的阴性样品，同法制备阴性对照溶液．精密吸取对照品溶液、供试品溶液及阴性对照 液各5p,L分别进样，按 “1．2．1”项条件测定．结果阴性对照在L一精氨酸相应的保留时间处无干扰(图1)．