青蒿琥酯 - 转铁蛋白复合物抑制癌细胞增殖的初步研究.pdfVIP

第42卷第6期 上海师范大学学报 (自然科学版) Vo1．42．No．6 2013年 12月 JournalofShanghmNormalUniversity(NaturalSciences) Dec．，20 13 青蒿琥酯 一转铁蛋白复合物抑制 癌细胞增殖的初步研究 杨 艳 ，张晓敏2，汪小芬 ，赵晓梅 ，余 波2，任天瑞 ，王 丰 (1．上海师范大学 生命与环境科学学院，上海200234；2．杭州普施康生物科技有限公司，杭州 310021) 摘 要：采用简单、快捷的药物配体 自识别的方式制备了青蒿琥酯(ATS)一转铁蛋 白(Tf)复 合物(ATS—Tf)．紫外一可见光谱分析表明：在正常生理条件 (pH=7．4)下，ATS与Tf易自组 装形成稳定的ATS—Tf复合物 (结合常数 为3．4×10L／mo1)；而在酸性条件 (pH=5．5) 下，结合能力相对变弱(Kf=1．7×10L／mo1)，ATS易与Tf分离，具有 良好的pH敏感性．同时 研究了该复合物对细胞增殖的抑制作用，结果表明：ATS—Tf复合物对正常肝细胞L一02的毒 性较低，而对人肺腺癌细胞A549、肝癌细胞HepG2和 胃癌细胞MGC一803的增殖具有显著的 抑制作用，表现出良好的靶向杀伤性，有望开发成新型靶向抗肿瘤药物．液相色谱法证实Tf增 强了癌细胞对ATS的摄取能力．进一步通过分子对接模拟和荧光光谱分析对ATS与Tf的结 合模式和机理进行了研究，提出了ATS—Tf靶向抑制癌细胞增殖的可能机理．研究为青蒿琥酯 靶向抗肿瘤药物的研发提供 了理论支持和实验依据 ，在癌症治疗领域具有 良好的应用前景． 关键词：青蒿琥酯；转铁蛋白；分子对接；光谱分析；抗癌活性 中图分类号：Q599 文献标识码 ：A 文章编号：1000-5137(2013)06-0615-08 0 引 言 青蒿琥酯(Artesunate，ATS)是从天然植物青蒿中提取的一种含内过氧化基团的倍半萜内酯化合 物H，是 目前常用的抗疟特效药之一．20世纪9O年代 以来，科学家发现除良好抗疟性之外 ，青蒿琥酯对 多种肿瘤细胞的生长具有显著的抑制作用 ，而对正常组织细胞的毒性较低 ，同时与传统化学治疗 药物有协同增效作用且无交叉耐药性 j．青蒿琥酯抗肿瘤作用的机理包括抑制或杀伤肿瘤细胞、阻滞 细胞周期、抑制血管生成、Fe 诱导的细胞凋亡等 J，其中Fe 诱导的细胞凋亡机理被广泛接受，即 Fe¨与Tf形成的全铁转铁蛋白(holo—Tf)进入细胞的胞吞体后 Tf的构象发生改变形成脱铁转铁蛋白 (apo—Tf)，并释放出Fe¨；释放的Fe¨在铁还原酶STEAP3的作用下生成 Fe “ ，使ATS内的过氧键 断裂，产生大量 自由基，破坏细胞膜和生物大分子，引起 DNA断裂，从而诱导细胞凋亡 J． 在Fe“诱导ATS促细胞凋亡机制中，转铁蛋白(Transferrin，Tf)和转铁蛋白受体 (TransferrinRecep． tor，TfR)发挥着重要作用．Tf是细胞 内铁元素的转运载体，TfR的介导作用实现了铁元素在细胞 内外的 运输．由于癌细胞膜表面大量表达TfR，而正常细胞表面TfR表达较少 ]，当Tf与ATS结合后，由于TfR 的介导作用，进入癌细胞的ATS较多，从而对癌细胞产生靶向杀伤作用 ]．由于游离的ATS容易扩散而 收稿 日期：2013-09-04 基金项 目：上海市教委基金项 目(13ZZ101) 作者简介：杨 艳(1989一)，女，上海师范大学生命与环境科学学院硕士研究生；王 丰(1971一)，男，上海师范大 学生命与环境学院讲师． 通信作者 616 上海师范大学学报 (自然科学版) 无选择性地进入细胞，导致对正常细胞也有一定毒性_9；而当ATS与Tf结合后，由于 Tf本身对癌细胞 的靶向性使得ATS对正常细胞的毒性显著降低．有实验证实当ATS与Tf联合用药时对鼻咽癌CNE2细 胞的增殖抑制作用是单独使用 ATS时的5倍以上_1。。，表现出更好的靶向杀伤作用． 尽管前人对 ATS与Tf联合使用时对癌细胞的抑制作用进行了相应的实验研究，但对 ATS与Tf结 合进入细胞后的抗癌作用机理却未进行明确的阐述与系统的研究，而