微甘菊愈伤组织培养的研究Ⅰ.愈伤组织的诱导.pdfVIP

维普资讯 第25卷第 2期 郑州工程学院学报 Vo1．25，No．2 2004年 6月 JournalofZhengzhou InstituteofTechnology Jun．2004 文章编号 ：1671—1629(2004)02—0043—04 微甘菊愈伤组织培养的研究 I．愈伤组织的诱导 廖劲松 ，郭 勇 (华南理工大学 食 品与生物工程学院，广东 广州 510640) 摘要 ；对影响微甘菊愈伤组织诱 导的因素进行 了系统研 究 ．结果表 明：芽尖和嫩 茎作为外植体 时诱导率较高，最适诱导培养基是Ms培养基附加 2．0mg／L2，4一D+1．0mg／LKT，pH值5．7， (25±1)℃条件 下黑暗诱导 ． 关键词 ：微甘菊 ；愈伤组织 ；诱 导 中图分类号：Q813．12 文献标识码 ：A 生物化学研究所生化技术公司，分析纯 ；琼脂 ：汕 0 前言 头海洋生物制 品厂 ．其它试剂根据实验 内容 的需 要主要采用分析纯或化学纯 ． 微甘菊 (MikaniamicranthaKunth．)属菊科 ，假 1．3 培养方法 泽兰属 ，多年生 ，草质藤本植物 ，善于缠绕和攀 附， 消毒：取微甘菊的嫩枝条 ，流水冲洗 1h，用 原产热带中南美洲国家，后传人澳大利亚的北部 2％漂 白粉水溶 液浸泡 2min，蒸馏水洗净后用 和非洲西南部 国家I1J．1997～1998年在深圳 内伶 0．1％的升汞消毒 5min，再用无菌水冲洗 5次 以 仃岛上 的生态环境考察 中发现 ，海拔 150m以下 ， 上备用 ． 有 50％的地 区被微甘菊所侵染 ，它对南方经济树 接种 ：将 已消毒 的嫩枝茎断和芽尖剪成长约 林有极大 的威胁 ，故称为植物杀手 ．目前 已从各种 0．5cm的切段 ，叶子剪成 1cm2左右 的方块 ，分别 途径人手开展微甘菊 防治方 面 的研究I2 J．微甘 接种 ． 菊强大 的生长能力 引起 了研究者们 的关注 ，本研 培养基 ：诱导培养基为 附加不 同植物激素 的 究就是希望通过对微甘菊愈伤组织和悬浮细胞培 MS、B5、White3种培养基 ． 养体系 的研究 ，从细胞学角度 了解微甘菊生长特 诱导 ：置培养箱 中在 (25±1)℃温度下，一部 性 ，研究与微甘菊生长 因子有关的生理 因素 ． 分黑暗培养 ，另一部分在光照条件下培养 ． 1 材料与方法 愈伤组织诱导率= 1文1r蓄口l／I’1且l—I．』、‘ 愈伤组织诱导过程观察 ：诱导过程定时对接 种的外植体生长情况拍摄 图片 ． 1．1 仪器与材料 HHBI1500电热恒温培养箱 (上海跃进医疗 器械厂)；CJJ808超净工作 台 (沈 阳医疗器械二 2 结果与讨论 厂)；pHS25型酸度计 (上海雷磁仪器厂)；微甘菊 2．1 环境条件对愈伤组织诱导 的影 响 标本采 自广东省广州市华南植物 园内． 2．1．1 光照对愈伤组织诱 导的影响 1．2 主要试剂 ． 黑暗条件下诱导，诱导率较高，愈伤组织色泽 2，4