偶氮还原酶的结构与生理功能及细菌还原脱色偶氮染料过程的全转录分析.pdfVIP

专题一环境微生物学研究前沿 染等优点，是菌丝球应用中传代的理想方法。 关键词：菌丝球：孢子；菌丝体 循环垂直流人工湿地去除猪场废水中氮、磷和抗生素污染的研究 黄栩刘超翔刘琳高誊芳王振朱葛夫 城市环境与健康重点实验室，中国科学院城市环境研究所．福建厦门，36102l 摘要：动物养殖废水中含有的高浓度的氮磷营养物，是水体富营养化的重要因素。由于动物养殖过 程中大量使用抗生素，养殖废水又成为环境中抗生素的重要污染来源。目前畜禽养殖业污染物治理水平 普遍偏低，全国90％的规模化畜禽养殖场污染物处理达不到环保要求。本研究以动物养殖废水为研究对 象，建造人工湿地中试系统，从脱氮除磷和抗生素去除两个方面入手，通过改变设计工艺和调节湿地运 行条件来提高氮磷和抗生素复合污染的去除效果：引入微生物和分子生物学技术，分析功能微生物群落 和丰度，用于指导人工湿地的运行；通过抗性基因的定量测定，对人工湿地处理含抗生素的动物养殖废 水的生态风险进行初步的评估。结果如下：l、我们设计的两个循环垂直流人工湿地中，以沸石为主要填 料比以火山岩为主要填料更为良好的传统污染物去除效果，能够有效地去除50．7％的COD，91．2％的 NH4．N，48．3％的TN和80．7％的TP，然后抗生素污染去除方面，以火山岩为填料处理效果更佳，：蓦其能 和氨氧化细菌群落与火山岩填料生物膜有显著的差异(po．05)。沸石填料生物膜的总细菌多样性和亚硝 化细菌多样性皆高于火山岩填料生物膜。系统发育分析表明沸石填料生物膜的反硝化细菌以产碱菌属 (么Zc口，fg鲫嚣)为主，亚硝化细菌以亚硝化螺菌属(肌D印肌I)为主；火山岩填料生物膜的反硝化细 菌以丛毛单胞菌属(cDm册D撒，)为主，亚硝化细菌以亚硝化单胞菌属(衔细5DmD嬲)为主。3、两个 人工湿地的出水的四环素类抗性基因的浓度低于进水中的浓度，并且填料中抗性基因的浓度与其对抗生 素的去除存在相关性。 偶氮还原酶的结构与生理功能及细菌还原脱色偶氮染料过程的全转录分析 柳广飞1周集体1王竞1傅翔1鼬 1大连理工大学环境学院2斯坦福大学市政与环境工程系3中科研南京地理与湖泊研究所 摘要：偶氮染料是分子中具有一个或多个偶氮基的芳香类化合物，由于其易于合成且性质稳定，被 广泛应用于印染、纺织、食品和制药等行业中。上述行业产生的染料废水的处理一直备受关注。相对于 传统的物理、化学方法，微生物对染料废水的处理由于其成本低廉、环境友好而成为人们研究的热点。 国内外学者陆续分离并考察了众多可脱色偶氮染料的微生物，纯化并研究了多种具有偶氮还原酶活性的 蛋白质，但相关研究仍有许多闯题亟待深入探讨： 人们对偶氮还原酶的研究多局限于在胞外酶反应中偶氮还原酶能够在辅酶存在下实现对偶氮键的还 原断裂，而对细菌偶氮还原酶的结构与功能缺乏更深层次的研究； 此外，由于偶氮化合物多为异生质类物质，由于人类的生产与合成才被大量释放到环境中：因此， 37 专题一坏境搬生物学研究前* 原本存在于细菌染色体上的偶氮还原酶基因可能并非专为参与偶氮染料的还原，即人们对于细菌偶氨还 原酶的生理功能缺乏了解： 近年来的研究表明，偶氮染料特别是具有磺酸取代基等极性取代基团、分子结构复杂的染料分子难 以透过细胞膜而进入细菌细胞内部。因此．人们对于位于细菌胞内的偶氟还原酶是否能够参与细菌细胞 对偶氨染料的还原产生质疑，同时对于参与细菌细胞还原偶氮染料的功能蛋白及细胞在还原过程中的响 应罕有认识。 基于上述问题，本课题组近年来开展丁大量的深入研究工作，深入分析了细菌偶氨还原酶的二级结 构模型，拓展了偶氮还原酶的底物谱、发现并首次报道了偶氯还原酶的生理功能；利用基因芯片技术， 对细菌还原偶氮染料过程的全转录组响应进行分析，深化了对细菌细胞还原偶氮染料的分}响应和机理 的认识。 一对偶氮还原酶^zR三级结构模型的研究 基于生物信息学的同源建模法，我们从R^o如抽c打枷d朗，幽偶氮还原酶A孤的氨基酸序列出发， 服务器(s瓣Model、DAu等)，成功构建了偶氮还原酶AzR的三级结构模型(图1)。 在此基础上，利用基因工程的定点突变方法研究Az