冬虫夏草及其无性型生药和提取物中甘露醇含量的HPLC法分析和比较.pdfVIP

中闰菌物学会第阴届会员代表大会暨全国第七届菌物学学术讨论会 冬虫夏草及其无性型生药和提取物中甘露醇含量的HPLC 法分析和比较 冯慧琴1糜可1’杨庆尧1’2’杨晓彤1 (‘上海师范大学生命与环境科学学院微生物与免疫学研究所上海200234； 2上海扬杨百草研究所上海200234) 摘要：冬虫夏学生药、其无性型(中华被毛孢)菌丝体及其各自提取物中的甘露醇含量用HPLC法进行了分析 和比较．样品用水进行超声提取，用Waters C18 Sep-PakCartridgesC18固相萃取小柱预处理，Hypersil 色谱柱分析，50 6ilson mmol几四乙基碘化铵溶液为流动相，流速o．6ml／min，柱温30℃， 132示差仪检 和22．8474-0．7690／0。冬虫夏单和虫草菌粉提取物中甘露醇含量均比原冬虫夏草和虫单菌粉高。用乙醇提取可从菌 丝体中获得含量高于天然虫草生药的提取物。 关键词：中国被毛孢。菌丝体，分析。比较 冬虫夏草[Cordyceps (Hirsutella 是冬虫夏草的主要药效成分之一，具有利尿脱水、镇咳、祛痰、平喘和清除人体内强毒性的羟自 由基等多种药理作用(孙成秀，1996)，因此甘露醇含量被用作反映虫草质量的一个重要法定指标 (药典2005版)。甘露醇含量现有测定方法主要有容量法、比色法、高效液相色谱法等(药典2005 版，李雪芹1998，董春明2005)。中1日药典规定的甘露醇含量测定方法是容量法，是用氧化剂滴 定甘露醇中还原性物质，适合较纯甘露醇制剂，虫筝样品中虫草化学成分非常复杂，有其他还原 性物质，将会干扰容量法测定的准确性。文献报道(刘谋盛2007，董春明2005)用高效液相法测 Vac 定甘露醇含量结果准确、可靠。我们用水超声振荡浸取，Sep—PakC18固相萃取预分离，高效 液相色谱法测定冬虫夏草和虫草发酵莳丝体及其提取物中的甘露醇含量。 1材料与方法 1．1仪器 Beckman Gilsion 125泵、RI 132示差仪，色谱 Gold高效液相色谱仪，包括System system VacC18ICC，Waters公司产品 预处理小柱：Sep-PakCartridges 1．2对照品和试剂 对照品：甘露醇，含量／99％，中国药品生物制品榆定所产品；批号：100533．200301； 试剂：无水乙醇(优级纯)，甲醇(HPLC级)，其余为国产分析纯 1．3样品 虫草无性型菌丝体粉：中国被毛孢发酵荫丝体，购自青海珠峰虫草药业有限公司产品，编号： HS。 虫草无性型荫丝体粉水提物、醇提物Ilj杨杨百草研究所提供：上述中国被毛饱发酵菌丝体分 别经水、乙醇超声提取，提取液浓缩冻干，编号：HS．W2和HS．A2，。 虫荸菌粉水醇提混合物由杨杨百草研究所研究所提供，编号：HS．WA2，。 冬虫夏草生药：产地为青海玉树。北京同仁堂总统牌，批号：070201，编号：冬虫夏草。 冬虫夏草水提物：冬虫夏草生药经水提取，提取液浓缩至干，编号：冬虫夏草W。 ’通讯作者： 267 中国菌物学会第四届会员代表大会暨全国第七届菌物学学术讨论会 1．4色谱条件 色谱柱：Hypersil VaeC18， ODS·C18(4．6‘250mm，Sum)，色谱预处理小柱：Sep—PakCartridges Gi[sion132 流动相：50mmol／L四乙基碘化铵溶液，流速：0．6ml／min，