在线自动化柱前衍生-高效液相色谱法测定食品中组胺研究.pdfVIP

第十七届全国色谱学术报告会及仪器展览会会议论文集 O．B001 在线自动化柱前衍生．高效液相色谱法测定食品中组胺的研究串 彭锦峰”，谢东华，俞雪钧，殷居易，房科腾，丁斌，崔晓美，倪梅林，陈树兵，黄绍棠 宁波出入境检验检疫局，!j。波315012 本文建立了在线自动化柱前衍生一高效液相色谱法测定食品中组胺的新型测定方法。通过对测定 过程中各个影响因素进行优化，如自动化衍生程序的设定，衍生试剂的用量，衍生体系pH值影响 等，确立了适宜的测定条件。在该条件下，对于组胺标准的测定低限为0．01 1ag／mL，在0．05．100pg／mL mg／kg。 范闱内，线性关系良好(r2O．999)。通过对样品基质进行加标，最终确立的最低检出限为O．20 将所建立的方法虑朋于金枪鱼罐头，烟熏鲣鱼，冻鲭鱼等样品中组胺的测定，测得的组胺含量为0．59· 167 mg／kg，加标同收率均大于97％，测定值的相对标准偏差均小于5％。本文所建立的方法采用自 动化梓前衍生程序和荧光法检测，具有重现性好，灵敏度高，分析通量人等特点，适用于大量样晶 的常规分析测定。 关键词：在线自动化柱前衍生；高效液相色谱法；组胺；食品 1 前言 组胺是组胺酸的降解产物，在黑皮红肉类鱼如金枪鱼、鲭鱼等的组织中易检测到该类物质的存 在。一般米说，新鲜鱼中组胺的浓度水平不超过50 mg／kg，但在变质的鱼肉中可检测到较高浓度的 组胺。因此，组胺常被作为产品质量的重要指示因子，用于监测食品生产和运输过程中产品质量的 变化。研究表明，一次性摄入含有大量组胺的食晶可引起过敏反应，对于对纽胺特别敏感的人，组 胺的摄入量为70．1000 mg时，会导致呕吐、晕眩甚至致死[1-6】。2006年春，台湾曾发生过食用鱼中 毒事件，分析人员在死者食用的鱼肉里检测到超过1000 mg／kg的组胺【7】。 冈此，食品中组胺的检测在食品化学领域日益受到重视。在过去的十几年中，已有多篇研究论 文报道了相应的检测方法。如荧光光度法，酶联免疫法，气相色谱法，毛细管电泳法等[8】。但复杂 的基质效应和样品分析干扰问题使得这些方法住实际应用时受到了很人的限制。而液相色谱法由于 具有良好的分离性能及较高的选择性和灵敏度，是组胺分析最常用的方法。本方法采用在线白动化 衍生技术，衍生反应通过程序可自动控制，反应后的产物直接进入液相色谱分析测定。减少了离线 衍生冈实验条件的偏差所带来的误差，增强了分析测定的重现性和准确性。同时，完全自动化的衍 生与分析流程大大节省了人力和分析时间，特别适合于人批量样品的分析测定。 2 样品制备、提取、纯化及液相色谱分析测定 mL min，置丁恒 称取5．0 mL聚丙烯离心管中，加入2050％的甲醇水溶液，均质1 g样品于50 min。 温水浴装置中于600C，150rpm振荡苯取30 将上述样品取出，4000 min，取5mL上清液丁15mL离心管中，刖磷酸调节其pH rpm离心10 至3．5左以，过WatersMCX柱(6cc，500 mL水，5mL甲醇活 mg)净化。净化程序为：依次刚5 O．01 mL mL测定。 化，样品上样，3mL N盐酸清洗，4 10％氨水．甲醇洗脱，最终川洗脱液定容至5 1200系统，配有自动进样器、荧光检测器及数据处理软件。检测 实验所用液相色谱为Agilent