中国地鼠Cyt+b基因序列测定与其分子进化研究.pdfVIP

实验动物科学 ·58· LABORATORYANIMALSCIENCE 2008年第25卷增刊 b基因序列测定及其分子进化研究 中国地鼠Cyt 宋国华刘田福岳文斌 (山西医科大学实验动物中心，太原030001)(山两农业大学动物科技学院，太谷030801) 摘要：目的测定中国地鼠线粒体DNA细胞色素b基因部分序列，分析其分子系统进化关系。方法提取中国地 他常用的实验动物物种细胞色素b基因进行同源序列比较，分析其碱基组成及变异情况，并用邻接法、最大简约 法、最小进化法构建了分子系统树，在分子水平上探讨中国地鼠和常用啮齿类实验动物的进化关系。结果获得 了中国地鼠线粒体Cytb基因的部分序列，共936bp。结论中国地鼠和金黄地鼠的亲缘关系最近，和小鼠、大鼠存 在的差异相对大，和豚鼠的亲缘关系最远，与传统的分类地位基本吻合。 关键词：中国地鼠；线粒体DNA；细胞色素b；分类地位 中国地鼠(Cricetulus鲥$eUfl)属啮齿目、鼠科、对仓鼠科动物的亲缘关系进行了研究和讨论川。 仓鼠亚科的动物；因其染色体大，条数少，且易于识 本研究对中国地鼠mtDNACytb基因部分序列进行 别，是研究染色体畸变和复制机理的材料；近交系中 了测定，并与鼠科其它物种的同源序列进行比较分 国地鼠易发生自发性遗传性糖尿病，是研究真性糖 析，进而讨论中国地鼠的分类学地位，为今后开展有 尿病的良好动物模型；在组织细胞体外培养中，易建 关中国地鼠线粒体基因的分子结构及基因表达与正 立二倍体细胞株；对多种细菌病毒和寄生虫高度敏 常生理功能及疾病发生的关系奠定基础。 感，是内脏利什曼病和阿米巴肝脓肿动物模型。可 见中国地鼠在医学生物学领域有着重要的研究价 1材料和方法 值‘11。 线粒体是一种细胞内的半自主性细胞器，是细 1．1实验材料 胞进行呼吸活动、产生能量的重要场所【2J。细胞色 实验动物是山西医科大学实验动物中心饲养的 b)位于线粒体内膜磷 素b(cytochromeb，简称cyt 脂双层中，是参与氧化磷酸化合成ATP过程电子传 er为大连宝生物公司产品。引物由上海生工公司 递链中的承要物质，也是线粒体自身编码的为数不 合成。 多的功能蛋白之一，其转录和翻译均在线粒体中进 1．2基因组DNA的提取 行pJ。哺乳类的有些疾病与cytb基因上某些碱基 取中国地鼠的尾巴，采用酚一氯仿抽提法提取基 的缺失或突变有关；cytb基因的mRNA表达量的增因组DNA。 b 减与机体某些器官的功能状况有关H]，提示cyt 1．3引物设计 基因在机体的正常代谢过程中的重要作用。 本研究根据GanBank中登录的小鼠线粒体基 在动物分类进化和系统分类研究中，由于线粒 体DNA具有快速进化、缺少重组、严格的母系遗传、 AY769440)基因序列，应用Clustalw1．83软件进行 基因组小、易于测序和分析等特点，作为一种有效的 6．0设计引物，扩 序列比对，在保守区用软件Oligo 分子标记得到了广泛的应用瞪’6]。目前，国内对中 增目的片段长约1000 bp，引物序列如下： CATCGTTGTAAT 国地鼠分类学地位的研究尚未见报道，国外学者曾 上游引物：5’一从A从T 基金项目：山西省实验动