皖西白鹅催乳素基因(PRL)编码区序列地克隆研究.pdfVIP

522ca中国动物遗传育种研究进展 microsatelliternadx％selectedfromthechickenGene—Bank．TheUPGMA cluster clusteredthe and amMysis xing as theFast andSlow Gustfichicksas andeolTi— green—shelleggsone，then one，then Feathering Feathering parental meI℃lalbreedsofGushi fiveGushichicken re． chicks∞one，then fines∞one，RossrouserandAvinbroiler∞one speetively． words：Gushi chicks；MiemsatellimMaskers；Genetic Key diversity；Clusteranalysis 皖西白鹅催乳素基因(PRL)编码区序列的克隆研究 陈兴勇 耿照玉 袁绍友 胡方宏 (安徽农业大学动物科技学院，合肥，230036) 摘要：本研究对皖西白鹅催乳素基因编码区序列分段进行了克隆与测序(GenBank登录号： 的保守性。 关键词：皖西白鹅；催乳素基因 血因子家族，其特征是有一保守的4个a．螺旋结构和几个与受体结合的高度保守位点…。免疫学方法 已证明，除了脑垂体前叶催乳素细胞分泌PRL外，其他细胞和组织也可以分泌PRL，如泪腺、胸腺、脾脏、 某些淋巴细胞等_2 动物并具有多种复杂的生理功能。对哺乳动物，PIlL的功能主要涉及泌乳；在鱼类其功能与渗透压调节 有关；而在禽类，PIlL的功能尚未被广泛认识，但大量试验证明在就巢和母禽育雏期间，PRL发挥了重要 的作用L3J。尽管其功能多样，不同来源PRL表现出相似的生理功能，PRL的结构是高度保守的。 鹅PRL基因的编码区序列进行克隆与测序，并与其他禽类进行比较分析，为进一步研究该基因的结构 及在家鹅中的表达调控工作奠定基础。 · 1材料和方法 1．1试验材料 另lml保存于一20℃冰箱。 胶叫收试剂盒购自U．Gene生物技术有限公司。 1．2试验方法 1．2．1基因组DNA提取 备用。 1．22 PCR反应 塞查坌王望焦皇宣登堡523 94℃变性45s，57～590C退火45s，72℃延伸45s，35个循环，最后4℃保存。 1．2．3PCR产物的克隆及序列分析 将经优化后的PCR产物从凝胶中回收，以除去一些非特异扩增产物及引物二聚体，连接到T载体 博距生物技术有限公司测序。 表1 皖西白鹅PRL基因扩增的引物序列 编号 引物位置 片段大小 上游引物 下游引物 Pl Exonl 155 ggaccccggatggtgtat te目caagtgaatggctaaag P2 Exon2 133 P3 Exon2 202 tgacegtge剐tlaaaetet gggzctateactgcetgtge P4 Exon3 181 ataacgcctctccttgctgagalct刚g．agctigct【=