植物源、大型真菌抗病毒活性物质筛选地研究.pdfVIP

生物防治467 植物源、大型真菌抗病毒活性物质筛选的研究 extYacts foranti-virussubstancefrom orherb weed，edible Screening fungi 田兆丰‘裘季燕1刘伟成1李永丹2 (1北京市农林科学院植保环保所，北京100089； 2中国农业大学植物保护系，北京100094) 摘要：对40科100多种野生植物、大型真菌及中草药抽提物进行了抗植物病毒筛选的研究，发现有多种 物抽提液对rMV及CMV兼有钝化作用和一定的治疗效果。本文对部分典型材料的抗病毒筛选结果进行 了总结和分析。 关键词：抗病毒；活性物质；筛选 由于种植结构及气候的变化，植物病毒病害发生非常普遍，特别是蔬菜病毒病害，有 逐年加重的趋势。由于病毒是寄生于寄主细胞之内，其防治比其他植物病害更加困难，所 以植物病毒病素有“植物的癌症”之称。植物病毒病的防治主要有抗病品种、抗病毒农药 以及栽培管理等措施。目前，生物农药由于无公害、无污染、低残留而成为当前抗病毒农 药研究的热点。 植物是抗生物质的重要来源，世界上已有试验证明，从植物体筛选植物病毒病治疗物 质是可能的。 早在1925年就发现商陆(Phytolacca 1984年报道了Pseuderanthemum 作用的物质【l】。Verma bieolar抽提液对烟草花叶病毒等多 种植物病毒引起的病毒病害有治疗作用12]。所以，植物是重要的天然资源，曾经从植物中 发现过不少有效的防病D1、治虫药物，如大蒜素、除虫菊脂等。这些药物不象化学合成的 其他化学物质，它们本身属于生物体内的一部分，易于被生物体代谢掉，而不会引起环境 污染等副作用。因而，从植物体筛选病毒治疗物质，作为寻找病毒病治疗物质的一条途径， 应加以探讨和研究。 1材料与方法 1．1抗病毒材料的收集 野生植物材料及野生蘑菇采自北京及其周边地区的菜田地头、公园或野外山坡等地， 食用菌及抗病毒中草药购于市场或各大药房。 1．2供试的寄主植物 468 中国植物病理学会2006年学术年会论文集 TMV的枯斑寄主采用心叶烟(Nicotiana NC-Xanthi)， glutinosa)和三生烟(N．tobacum 其系统寄主采用NC．83普通烟及茄门甜椒等；CMV的枯斑寄主采用苋色藜，其系统寄主 采用三生烟。 6片真叶期使用。 1．3病毒毒原的繁殖和保存 TMV分别保存于枯斑三生烟及普通烟上。 病毒接种液由新鲜毒原和磷酸缓冲液(PB)(pH7．2)以1：50的比例研磨，过滤而成。 1．4病毒抗血清 TMV、CMV抗血清购自美国Agdia生化试剂公司，保存在冰箱中备用。 1．5抗病毒抽提物的制备 收集的供试植物材料(通常为叶片)一般不表现明显的病毒病害症状。新鲜植物材料 或菇类以100倍磷酸缓冲液抽提；干材料以80℃烘干、粉碎、研磨并以200倍磷酸缓冲液 1．6枯斑法对病毒钝化效果测定 选择健康的三生烟(心叶烟)或苋色藜，半叶法接种TMV或CMV浸提液和蒸馏水 分别与等体积的病毒溶液混合后，立即分别涂抹于三生烟(心叶烟)或苋色藜的左、右半 叶，待叶片表面自然干燥后左右半叶同时接种病毒，接种病毒后的植株置于25～30℃的温 室中，48--,72h后叶片上出现病毒枯斑，分别记录左、右半叶的枯斑数。每个抽提物接种 10株，每株接种3片叶。 病毒侵染抑制率的计算公式如下： 对照枯斑数．处理枯斑数 病毒浓度减低率％= X100％ 对照枯斑数 1．7系统侵染法对病毒病治疗效果测定