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L一赖氨酸发酵的研究
江南大学生物工程学院 张伟国
完全和种子培养基均以20%NaOH调pH至
引言 7.O一7.2,0.1Mpa压力下灭菌20min。
L一赖氨酸是人体和动物所不能合成的八种必
需氨基酸中最重要的一种。目前,90%以上的L一 O.07Mpa压力下灭菌8min。
赖氨酸产品用于饲料工业,如豆粕中添加适量的 1.3培养方法
L一赖氨酸,可以大大提高蛋白质的利用率,促进 1.3.1斜面、平板培养方法
禽畜生长。由于国内饲料工业惊人的发展速度, 恒温箱温度31±1℃,培养24h。
L一赖氨酸的市场需求与日俱增。但由于发酵产酸 1.3.2摇瓶培养方法
水平较低,生产规模较小,致使生产成本较高, 摇床为往复摇床,振次100±2次/IIIin,振幅
难于同进口产品竞争。因此,很有必要选育L一赖 mL三角瓶
8cm,温度31±1℃,种子装液量500
氨酸高产菌,并采用先进的补料工艺提高产酸率 100mL,种子培养12h;发酵装液量500mL三角
和糖酸转化率,使我国的赖氨酸工业具有国际竞 瓶25mL,发酵培养72h。
争力。 1.3.3 7L发酵罐培养方法
l材料与方法 初始装液量为3.6L,接种量lO%,初糖浓度
1.1 菌株 约为16~18%,通气量为1vⅧ,搅拌转速300~
L一赖氨酸高产菌XQ一8(AECSuc吼7-sGr)600帅m,以维持相对溶氧百分浓度在30%以上,
【“,由黄色短杆菌(Brebvibacteriumfla、,um)。 发酵温度3l℃,流加25%的氨水以控制pH在6.7
ATCCl4067选育而来。 左右,中间每隔2-4h检测残糖浓度,并流加50%
1.2培养基(%) 的葡萄糖,维持残糖浓度在3~4%,发酵时间约为
1.2.1 完全培养基 72h。
葡萄糖0.5,牛肉膏1.O,蛋白胨1.0,NaCl1.4分析方法
0.5。琼脂条2.5。 1.4.1 pH
1.2.2种子培养基 用精密pH试纸和酸度计测定。
葡萄糖2.5, 0,1, 1.4.2 菌体生长
(NH4)2SO。0.5,KH2P04
5mL
Mgs04。7H200.05,玉米浆3.5~4.O,CaC031.0。 吸取样品菌液0.2mL到O.25moL几HCl
1.2.3发酵培养基 溶液中,摇匀后测定A562咖值。
葡萄糖12~20, 1.4.3还原糖
(NH4)2sO。40~60,KH2Po。1,
MgS04。7H200.5,玉米浆0.5—1.5,L.苏氨酸O.2~ 菲林试剂滴定法【2J。
4.0。 1.4.4
0.6,CaC03
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