某中药复方中柴胡皂苷A与D的LC-MS-MS研究.pdfVIP

第20卷增刊 分析测试学报 V01．20 FENXI of CESHI Instrumental 2001年7月 XUEBAO(JournalAnalysis) Jul．2001 某中药复方中柴胡皂苷A和D的 1 S—M LC—M S研究 刘国文，刘密新，吴筑平，杨成对 (清华大学分析中心，北京100084) 某中药复方是由黄芩、柴胡、半夏等11味药材精制而成，柴胡是其中i味主要药材，现代药理学研究表 明，柴胡中柴胡皂苷类成分具有解热、镇痛、镇静、镇咳及保肝等作用…，而其中含量最高、药理活性最强的 是柴胡皂苷A和D12·“。因此复方中柴胡皂苷A和D的研究对复方的质量控制及制备工艺的指导具有重要 的意义。 本文采用了1／2一MS对复方中的柴胡皂苷类成分进行了分析。 1 实验部分 1．1仪器、试剂和样品材料 3000 仪器：美国PE公司APILC—MS—MS液一质联用仪。 试剂和样品材料：甲醇、乙腈为色谱纯；二次重蒸水；标准品：柴胡皂苷A、D购于日本和光纯药工业株 式会社。 1．2色谱一质谱条件 C，s 色谱条件：色谱柱KromasilODS柱，5 mm)。流动相：乙腈一水，紫外检测波长254nrn， um(4．6×250 变为55：45。 800 L／ 质谱条件¨”：扫描方式为正离子扫描，检测方式为选择离子检测，电喷雾电压4 V，雾化气0．87 min；气帘气1．25L／rain，辅助气流5L／rain，离子源温度350℃。 1．3实验方法 (1)标准品溶液的配制：精确称取适量柴胡皂苷A、D标准品，以甲醇溶解定容于2mL的容量瓶中摇匀 备用。 (2)样品的处理：称取中药复方1 0．45 t-tm过滤膜过滤后备用。 (3)标准品添加实验：在样品中加入A和D的标准品，再以3．2方法进行处理。 (4)标准品实验：取柴胡皂苷A和D的标准品适量，分别以适量重蒸水溶解。然后A和D的水溶液分 醇稀释20倍后待用。 (5)以柴胡皂甙A和D的准分子离子m／z782(M+H)为检测对象，进行选择离子检测。 2结果与讨论 图)和图5(柴胡皂苷A和D经中性处理后的选择离子色谱图)。 和D的3个同分异构体，根据文献[2】可知，柴胡皂苷A和D在酸性条件下会重排转化为具有共轭双键结构 的柴胡皂苷B。和B：，柴胡皂苷A，D，B。和B：的结构式如图2所示。 分析测试学报 第20卷增刊(2001) R．O 柴胡皂苷Bl：Rl_Glc一3Fuc，R’=口一OH 柴胡皂苷A：Rl-Glc一3Fuc，R2=口一OH 柴胡皂苷B2：Rl-Glc一3Fuc，R2=J9一OH 柴胡皂苷D：Rl=Glc一3Fuc，R2=卢一OH 图2柴胡皂苷A、B。、B2、D的结构式 应为柴胡皂甙B：，从图5可知，柴胡皂甙A和D在中性溶液中基本无变化，是稳定的。 (3)在该复方的制备工艺过程中，对柴胡药材采用的是水煮工艺，由于在柴胡药材中含有酸类物质¨1， 在煎煮的过程中会导致水溶液酸性变强。这可能使得柴胡皂苷A和D在煎煮过程中发生了重排。由于柴胡 皂苷A和D的药理活性大于B。和B：【3】，建议在复方制备工艺过程中，通