清肠化湿方对溃疡性结肠炎模型大鼠结肠TLR-4、NF-κBp65蛋白表达与影响.pdfVIP

升高，脂质过氧化程度加强，进一步加剧对细胞的损伤程度，这是导致结肠炎症及溃疡形成的一个 机制，因此本实验选择UC大鼠血清及结肠组织匀浆中SOD活力、MDA含量来评价药物治疗作用。 研究发现，造模后模型组UC大鼠血清及结肠组织匀浆中。SOD活力明显下降(与正常组比较， 干预治疗后，3个用药组中大鼠血清和结肠组织中SOD活力皆有不同程度的升高：MDA含量均有 含量与CMDI呈正相关(PO．01)。 本研究结果提示，UC的发生发展与SOD和MDA异常有关，血清和结肠组织匀浆SOD活力及 MDA含量的变化能反映结肠炎症的严重程度。肠涤清+肠炎清组可显著提高大鼠SOD活力、降低 MDA含量，减轻结肠黏膜炎症，显示出中药辨证论治、多途径、多靶点作用的优势。提高SOD活 力及降低MDA含量是清热祛湿法治疗大肠湿热型UC的可能作用机制之一，其原理可能是清热祛 湿中药能有效地清除氧自由基，从而抑制结肠组织中的脂质过氧化反应，并能稳定细胞膜，提高机 体抗自由基损伤的能力，从而增强对细胞的保护作用，促进炎症和溃疡的愈合，可为临床治疗提供 参考依据。但是由于本实验条件所限，并未复制出大肠湿热证模型，故动物实验并不能完全说明临 床问题，在今后的研究中有待进一步探讨。 (参考文献略) 清肠化湿方对溃疡性结肠炎模型大鼠结肠 TLR一4、NF-KBp65蛋白表达的影响 顾培青沈洪★刘丽 朱磊朱萱萱 叶柏郑凯刘亚军 周晓波刘云 南京中医药大学附属医院★通讯作者 溃疡性结肠炎(ulcerative colifis，UC)是一种反复发作的肠道慢性非特异性炎症性疾病，其病 机复杂，病因尚未完全阐明，免疫学因素被认为是主要方面。随着免疫学、分子生物学等学科的迅 速发展，通过抑制Toll样受体(toll．1ike B，NF-r,B) recepters，TLRs)／核因子．KB(nuclearfactor-kappa 通路的关键分子进而阻断UC的炎症反应己成为研究热点之一。中医学认为UC活动期以湿热蕴结 为主要病机，我们以清热化湿、敛疮生肌为治则，对刘完素治痢名方“芍药汤”进行化裁，创立了 清肠化湿方，用于轻中度UC的治疗取得了良好的效果。本实验采用TNBS诱发大鼠UC模型，观 察清肠化湿方对结肠黏膜TI且-4、NF．r,Bp65蛋白表达的影响，探讨其作用机制。 l材料与方法 1．1材料 境饲养；清肠化湿方(黄连、黄芩、白头翁、煨木香、炒当归、炒白芍、生地榆、白蔹、肉桂、生 甘草)由江苏省中医院药材科提供颗粒剂，按10倍成人用量即169／kg用蒸馏水配成浓度为1．69／m1 ．．．．—343．．．．． 限公司，批号1412514)；全细胞蛋白提取试剂盒(Activemotif公司)；BCA．100蛋白质定量测定试 life 剂盒(上海碧云天生物科技有限公司)；预先染色的蛋白分子量标准品(Marker，FermentasSciece 公司)，兔抗TLR4、NF-lcB：5多克隆抗体，兔抗13．actin多克隆抗体(SantaCruz公司)；显色法免 公司)；GS．800型光密度扫描仪(Bio-Rad公司)。 1．2方法 1．2．1 造模：采用TNBS灌肠法制作UC大鼠模型。造模型前禁食24h，留取部分动物作为正 入，深度为8 后放回笼中自然苏醒，并常规饲养。 1．2．2给药方法与标本留取：造模后第3天，模型动物分为模型对照组、清肠化湿方组和巴柳 氮组，并同时开始按上述剂量给药，给药体积为10mL／kg。正常对照组及模型组给等体积蒸馏水， 每天1次，连续10d。末次给药24h后，脱颈椎法处死大鼠，取肛门至盲肠部结肠(约8cm)，沿肠 系膜纵轴剪开，用冷0．9％氯化钠溶液冲洗干净后4．O％多聚甲醛固定，进行肉眼大体形态评分，肠组 织一部分石蜡包埋，4um连续切片，HE染色镜下评价炎症和溃疡，另一部分--70℃冻存，用于结肠 组织中TLR-4、NF