大黄鱼过氧化物酶 IV在人胚肾细胞中的表达与抗氧化活性测定.pdfVIP

第３３卷　第４期 应 用 海 洋 学 学 报 Ｖｏｌ３３，Ｎｏ４ 　２０１４年１１ 月 Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ａｐｐｌｉｅｄ Ｏｃｅａｎｏｇｒａｐｈｙ Ｎｏｖ．，２０１４ 大黄鱼过氧化物酶 ＩＶ在人胚肾细胞中的 表达与抗氧化活性测定 １，２ ２ １ ２ ２ 王贤慧 ，母尹楠 ，聂　品 ，陈新华 ，敖敬群 （１．集美大学水产学院，福建 厦门３６１０２１； ２．国家海洋局第三海洋研究所、国家海洋局海洋生物遗传资源重点实验室，福建 厦门３６１００５） 为了研究大黄鱼（Ｐｓｅｕｄｏｓｃｉａｎａ ｃｒｏｃｅａ）ｐｅｒｏｘｉｒｅｄｏｘｉｎ ＩＶ（ＬｙｃＰｒｘＩＶ）在细胞内的抗氧化功能，构 摘要： 建了表达大黄鱼ＰｒｘＩＶ 的重组质粒ｐＣＭＶＬｙｃＰｒｘＩＶ，瞬时转染人胚肾细胞（ＨＥＫ２９３Ｔ），利用Ｗｅｓｔ ｅｒｎ ｂｌｏｔｔｉｎｇ方法检测转染后的细胞样品中ＬｙｃＰｒｘＩＶ 的表达情况，并通过测定细胞内过氧化氢浓度 来评价ＬｙｃＰｒｘＩＶ 的体内抗氧化作用．结果显示，ＬｙｃＰｒｘＩＶ 可在转染重组质粒ｐＣＭＶＬｙｃＰｒｘＩＶ 的 ＨＥＫ２９３Ｔ细胞中表达，且细胞中Ａ 处的吸光值在转染后６、１２、２４ ｈ后分别为０．１５４、０．１１６ 以及 ５６０ ０．１６２，而瞬时转染空载体ｐＣＭＶ后细胞样品在Ａ 处的吸光值在转染后一直稳定在０．２６０ 左右， ５６０ 说明细胞中过氧化氢的浓度在转染后６、１２、２４ ｈ 时明显低于瞬时转染空载体ｐＣＭＶ 细胞中的过氧 化氢浓度（ｐ＜０．０１）．表明ＬｙｃＰｒｘＩＶ在生物体内可以分解过氧化氢，参与生物体内氧化还原状况 的调控． 海洋生物学；大黄鱼；过氧化物酶ＩＶ；细胞表达；过氧化氢 关键词： ＤＯＩ：１０．３９６９／Ｊ．ＩＳＳＮ．２０９５４９７２．２０１４．０４．００６ 中图分类号：Ｐ７３５ 文献标识码：Ａ 文章编号：２０９５４９７２ （２０１４）０４０４９２０７ 　　大黄鱼（Ｐｓｅｕｄｏｓｃｉａｎａ ｃｒｏｃｅａ）俗称黄花鱼，是我 ２Ｃｙｓ Ｐｒｘ４个成员的同源性则在４０％左右．该家族 国独特的海水经济鱼种，近几年随着养殖规模的扩 蛋白在Ｎ端均具有一个保守的Ｃｙｓ残基，还有部分 大及养殖环境的日益恶化，产业资源遭到严重破 成员在Ｃ端也有一个保守的Ｃｙｓ残基．根据其保守 坏，已成为制约大黄鱼养殖业持续稳定发展的主要 Ｃｙｓ残基的数目不同，可以分为２ 个亚家族，即１ ［１］ ［３４］ 因素 ．要实现对病害的有效防治，必须充分了解 Ｃｙｓ Ｐｒｘｓ（ＰｒｘＶＩ）和２Ｃｙｓ Ｐｒｘｓ（Ｐｒｘ Ｉ －Ｖ） ．尽管 大黄鱼免疫的分子机理，研究免疫相关基因的功 不同类型的Ｐｒｘ 分布在不同的组织和细胞中，但它 能，以利用大黄鱼自身免疫因子增强其抗病力，抵 们的重组表达产物在体外都同样有较强的抗氧化 ［２］ 御病原微生物的入侵，确保大黄鱼的健康养殖，提 活性 ． 高经济效益．