四君子汤预处理对急性心肌缺血大鼠的保护作用研究_临床医学论文.docVIP

四君子汤预处理对急性心肌缺血大鼠的保护作用研究_临床医学论文 四君子汤预处理对急性心肌缺血大鼠的保护作用研究_临床医学论文 作者：曾振兴， 黄勇其， 钱海兵 【摘要】 目的探讨四君子汤预处理对急性心肌梗塞的保护作用。方法四君子汤预处理后，以结扎左冠状动脉制作大鼠急性心肌缺血模型，通过观察四君子汤对急性心肌缺血大鼠心肌梗塞面积、血浆乳酸脱氢酶(LDH)、肌酸激酶(CK)、丙二醛(MDA)含量的影响，探讨四君子汤预处理对急性心肌缺血的保护作用。结果四君子汤预处理可以缩小心肌梗塞面积，降低血浆中LDH、CK、MDA含量。结论四君子汤预处理对大鼠急性心肌缺血具有保护作用。 【关键词】 四君子汤; 心肌梗塞; 乳酸脱氢酶; 肌酸激酶; 丙二醛 　缺血性心脏病是由冠状动脉供血不足，心肌急剧、暂时缺血缺氧所引起，其中血管狭窄、血栓形成及血管内皮功能异常是其重要的发病原因。缺血性心脏病属于中医“真心痛”“猝心痛”范畴。中医治疗该病具有悠久的历史，并取得良好的临床疗效，方法多以活血祛淤为主。近年来研究发现，“气虚血淤”是心肌缺血的一个主要病因，而行气活血，补气养血等方法也成为治疗心肌缺血、减少心肌梗塞死亡率的有效治则。 　　四君子汤始载于《太平惠民和剂局方》，具有益气健脾功能，是中医传统补气方剂。因此，本研究从中医“气”与“血”的关系入手，以改变“气虚血淤”的病理状态为目的，对四君子汤进行了预处理抗急性心肌缺血的探索研究。 　　1 材料与仪器 　　1.1 药品与试剂四君子汤(人参9 g,白术9 g,茯苓9 g,炙甘草6 g)，由贵阳中医学院制剂室制备;地奥心血康胶囊，成都地奥制药集团有限公司生产;乳酸脱氢酶(LDH)检测试剂盒:南京建成生物工程研究所;肌酸激酶(CK)检测试剂盒: 南京建成生物工程研究所;丙二醛(MDA)检测试剂盒：南京建成生物工程研究所;氯化三苯基四氮唑(TTC):中国医药(集团)上海化学试剂公司。 　　1.2 动物雄性SD大鼠，50只，体质量220～250 g，由成都中医药大学实验动物中心提供。 　　1.3 仪器TGL-16G台式离心机(上海医用分析仪器厂);酶标仪(瑞士 Tecan Systems Inc)。 　　2 方法 　　2.1 动物分组大鼠随机分为假手术组、模型组、四君子汤(SJZT)高、低剂量组和地奥心血康(DAXXK)组。 　　2.2 供试药品制备人参、白术、茯苓、炙甘草共同浸泡、煎煮、去渣，浓缩至药液浓度为1 g/ml(含生药)，4℃保存备用;地奥心血康胶囊，成都地奥制药集团有限公司生产，批号：0408046，每粒含甾体总皂苷100 mg，临用前取胶囊内容物用蒸馏水配成所需浓度混悬液。 　　2.3 给药方法造模前7 d连续灌胃给药，四君子汤(SJZT)高、低剂量组分别予7，3.5 g/(kg·d)(相当于人临床剂量10，5倍)，地奥心血康(DAXXK)对照组灌胃剂量为生药量0.06 g/(kg·d)，模型组和假手术组分别给予相同体积的生理盐水。 　　2.4 造模方法参照文献[1]并稍作改进。末次给药1 h后，给予水合氯醛溶液(35 mg/kg)腹腔注射麻醉后仰卧固定于实验动物手术台上，行气管插管，接小动物呼吸机，呼吸频率60次/min，潮气量8～12 ml，吸/呼比为1∶1，连接心电监护，记录术前心电图。大鼠胸前左侧至腋窝处手术备皮，常规消毒后，距皮肤中线5 mm纵行切开皮肤，钝性分肌肉，暴露第2到第4肋骨。切断第3肋骨，剪断肋间肌肉组织，用小动物开胸器固定切口，分离心脏包膜，暴露结扎区域，用0号医用缝合针线永久性结扎冠状动脉左前降支。观察心电图变化，显示ST段抬高，并且心脏出现因缺血而致的颜色改变，为手术成功。细密缝合胸腔、皮肤组织，手术区域再次消毒。待动物呼吸频率和心律平稳后，撤掉心电监护和呼吸机，实验动物恢复自主呼吸。同样手术方式，仅穿线但不接扎冠状动脉左前降支，设立假手术组。 　　2.5 检测指标 　　2.5.1 心肌梗塞范围的检测大鼠麻醉后，取出整个心室组织，放入预冷的生理盐水清洗两次。将清洗后的完整心脏保持原形态放入-20℃预冷冻1 h，置于冰上，沿结扎线下将心脏切成1.5～2 mm厚的冠状切片，在1%(W∶V)的氯化三苯四唑(TTC)溶液孵育15 min(37℃)，然后在4%多聚甲醛中固定30 min。薄片经数码相机拍照后输入计算机。经 Imagetool 图像分析软件计算梗塞区面积及心室面积。梗塞面积的百分比(%)=梗塞面积/左心室肌危险区的面积。其中，白色区域为梗塞区，红色区域为缺血危险区。 　　2.5.2 LDH、CK、MDA的测定结扎冠状动脉4 h后，大鼠用35 mg/kg水合氯醛麻醉后，剪开腹部，从腹主动脉处抽取5 ml血液，置于肝素抗凝管中，离心(3 000 r/min,10 mi