四氢生物蝶呤对高胆固醇血症所致血管内皮细胞功能异常的转复机制探讨_临床医学论文.docVIP

四氢生物蝶呤对高胆固醇血症所致血管内皮细胞功能异常的转复机制探讨_临床医学论文 四氢生物蝶呤对高胆固醇血症所致血管内皮细胞功能异常的转复机制探讨_临床医学论文 【摘要】 研究高胆固醇血症兔的血管内皮功能的异常状况及四氢生物喋呤(BH4)的转复机制。方法:18只新西兰兔，随机分为正常饮食组、高胆固醇饮食组、BH4加高胆固醇饮食组。喂养5周后,测定血中总胆固醇、一氧化氮(NO)及丙二醛水平,并取主动脉,进行离体血管舒张功能实验,测定不同条件下，血管条对乙酰胆碱的舒张反应。结果:与正常饮食组比较各胆固醇喂养组血清总胆固醇明显增高,有极显著性差异(0.01 )。高胆固醇饮食组与正常饮食组比较血中NO水平明显减低(Ｐlt;0.01 ), 丙二醛浓度明显升高(Ｐlt;0.01 ); BH4加高胆固醇饮食组与高胆固醇饮食组比较NO水平明显升高(Ｐlt;0.05)，而丙二醛的水平较高胆固醇饮食组明显降低。不同组别的动脉对乙酰胆碱最大舒张功能存在明显差别,高胆固醇饮食组的舒张功能较其他组明显下降; BH4加高胆固醇饮食组的舒张功能,较高胆固醇组明显恢复。结论：高胆固醇血症导致血管内皮细胞舒张功能障碍，BH4对其具有转复作用，其转复机制可能与BH4升高血液中的NO和降低过氧化物的水平有关。 【关键词】 四氢生物蝶呤；高胆固醇血症；内皮细胞功能；一氧化氮；丙二醛 血管内皮细胞处于血液与组织的界面,具有调节血管张力、血管生长与炎症免疫反应,维持凝血纤溶平衡,充当物理与化学屏障等多种功能。高血压、糖尿病、长期吸烟等多种危险因素均可导致血管内皮功能异常,其突出表现为内皮依赖性血管舒张功能受损,这种舒张障碍既可发生在大动脉如颈动脉,也可发生在微小动脉如冠状阻力动脉[1]。研究表明，血管内皮功能异常主要与一氧化氮( nitric oxide, NO) 水平下降以及氧自由基如超氧阴离子增加相关。NO主要由血管内皮细胞合成,源自底物左旋精氨酸(L，在NO 合酶(nitric oxide synthase, NOS)的作用下产生[2]。 四氢生物蝶呤（Tetrahydrobiopterin, BH4) 则是NOS 作用的重要辅助因子。近年研究发现, BH4 与血管内皮功能密切关联。缺乏BH4将导致血管内皮功能的异常[3]。内皮细胞功能异常与动脉粥样硬化密切相关。由于高胆固醇血症是动脉粥样硬化的主要危险因素之一，本课题旨在探讨高脂血症家兔的内皮细胞功能及其BH4对其产生的影响和机制。 1 材料与方法 1.1药品BH4购自美国Sigma公司(每支100mg)。 1.2实验分组选用6月龄18只新西兰纯种雄性白兔，体重2～2.5 kg。随机分为3组:对照组(进食普通饲料)、高胆固醇饮食组、BH4加高胆固醇饮食组。动物于实验前先作一周的适应性喂养。一周后，高胆固醇饮食组和BH4加高胆固醇饮食组每日每只添加胆固醇15 g。所有实验动物均限食量,每只每日200 g,自由饮水,共喂养5周。BH4加高胆固醇饮食组动物在喂养最后一周耳缘静脉注BH4 10 mg·kg，隔日一次，共三次；对照组耳缘静脉注射相等容量的生理盐水。 1.3测定方法血清总胆固醇的测定：心脏穿刺取血，3000转/分离心后取血清,用日立7170型全自动生化分析仪检测。NO水平测定：酶法测定NO (nitric oxide , NO)终产物NO2, NO试剂盒由北京晶美生物工程有限公司提供。丙二醛浓度测定：以硫代巴比妥酸反应物质(thiobarituric acid reactive substance TBARS)法[4]测定血液中脂质过氧化终产物丙二醛 (malondialdehyde,ＭＤＡ)含量, 间接反映血液中过氧化物的水平，结果以μmol·L-1硫代巴比妥酸反应物质表示。动脉舒张功能测定: 动物处死后, 取主动脉制备长约4 cm的环行标本。将标本沐于37℃盛有台式液的恒温浴槽中, 通过机械电换能器与BL410生物机能实验系统连接, 用来记录血管条张力变化。定标后，测定血管条基础张力为98×10-3N。给予乙酰胆碱1.0×1 0-5～3.0×1 0-5mol·L-1, 至血管舒张达最大限度时，记录血管的张力。 1.4统计学处理：各组计量资料以x±s 表示, 应用SPSS10.0 软件进行统计学分析, 两组间比较采用t 检验, P＜0.05有显著性差异。 2 结果 2.1 血脂、NO及丙二醛水平变化结果见表1，动物喂养5周后，与正常饮食组比较，高胆固醇饮食组及BH4加高胆固醇饮食组血清总胆固醇明显增高, 有极显著性差异(Ｐlt;0.01 )。同时测定NO显示,高胆固醇饮食组较正常饮食组NO水平明显减低, 有极显著性差异 (Ｐlt;0.01 ); 血液中丙二醛的间接测量指标TBRS的含量较正