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外阴HPV感染患者中宫颈HPV分型检测_临床医学论文 外阴HPV感染患者中宫颈HPV分型检测_临床医学论文 作者：施铮铮，杨孝军，许张晔，陈云琴，郑飞云 【摘要】 目的:研究外阴尖锐湿疣(Condyloma acuminata，CA)和外阴鲍温样丘疹病(Bowenoid papulosis，BP)患者宫颈细胞人乳头瘤病毒(HPV)的检出情况，尝试为此类患者群的宫颈病变筛查或宫颈癌的防治提供流行病学依据。方法:选取自2007年1月至6月间在我院妇科门诊首次就诊的44例外阴CA和7例外阴BP患者，采集宫颈细胞应用导流杂交基因芯片技术（凯普HPV分型）行21种HPV-DNA亚型检测；同期检测54例慢性宫颈炎患者作对照。结果:外阴CA组和BP组的宫颈高危型HPV检出率分别为56.82 %和85.71%，均显著大于对照组（20.37%），P lt;0.01；外阴HPV感染组较对照组更易发生高危型HPV的多重感染(P lt;0.05)，其中以二重和三重感染为主；外阴CA患者的宫颈HPV感染以低危型11、6亚型为主，高危型HPV感染中以58、16、52亚型位居前三位，其中检出CIN II级1例；外阴BP组中宫颈HPV感染以16亚型为主，检出CIN I级、II级共2例。结论:外阴CA和BP患者临床体征明显，易于诊断，但可能会伴发宫颈高危型HPV感染，从而导致宫颈上皮内瘤变（CIN）甚至宫颈癌的发生。 【关键词】 外阴；尖锐湿疣；鲍温样丘疹病；宫颈；HPV感染 随着对人乳头瘤病毒（human papilloma virus，HPV）与女性生殖器相关疾病研究的深入以及HPV检测技术的不断升级，临床中女性生殖道HPV感染的检出率亦随之增加。外阴HPV感染可致外阴的尖锐湿疣(Condyloma acuminata，CA) 和鲍温样丘疹病(Bowenoid papulosis，BP)等疾病。但HPV多灶性感染的特征，可能会同时导致宫颈细胞的HPV感染[1]，其早期多表现为潜伏性感染和亚临床感染（subclinical human papilloma virus infection，SPI），肉眼难以识别，易被忽视。现已明确高危型HPV持续性感染是宫颈上皮内瘤变（CIN）和宫颈癌的主要致病因素。我们应用凯普导流杂交基因芯片技术，采集外阴CA、BP患者的宫颈细胞行HPV-DNA 的分型检测，以研究此类患者中宫颈感染HPV的型别及伴发相关宫颈疾病的状况。 1 资料和方法 1.1 一般资料 选择自2007年1月至6月间在本院妇科门诊首次就诊的患者，均主诉外阴赘生物，经活检病理确诊为外阴CA患者44例，外阴BP患者7例。年龄18～63岁，平均（36.2±11.1）岁。外阴CA患者中宫颈检查发现疣状赘生物者9例，不同程度宫颈糜烂者36例；外阴BP患者中宫颈检查未发现赘生物，宫颈糜烂4例。选取同期就诊的54例外阴正常而患慢性宫颈炎者作为对照组，其中临床检查宫颈糜烂者44例，年龄21～54岁，平均（37.3±7.4）岁，两组年龄相比差异无显著性（P＞0.05）。 1.2 方法　 1.2.1 按照凯普导流杂交HPV-DNA检测法要求，两组研究对象均用无菌棉签拭净宫颈口分泌物，专用HPV采样刷紧贴宫颈口及宫颈管旋转取得脱落细胞，再将宫颈刷放入盛有细胞保存液和识别编号的取样管中待检。采用凯普医用核酸分子快速杂交基因分型试剂盒作HPV-DNA检测及分型。实验操作与结果判断按试剂盒要求进行：①宫颈细胞HPV-DNA 提取、PCR扩增；②核酸分子快速导流杂交；③显色HPV基因分型。该试剂盒可检测13种高危型HPV-DNA：16、18、31、33、35、39、45、51、52、56、58、59、68亚型；5 种低危型HPV-DNA：6、11、42、43、44亚型；另可检测出3种中国人群特有的高危亚型HPV 53、66亚型及CP8304；共计21种HPV亚型。本研究中，将缺乏细胞形态学变化，仅HPV-DNA检测呈阳性者称为HPV的潜伏性感染[2]；芯片上HPV亚型分布显色后出现二点或二点以上阳性即为多重感染[3]。 1.2.2 外阴CA和BP组中，肉眼可识别的宫颈疣样赘生物直接取组织活检。其余患者及对照组患者均接受阴道镜下宫颈多点活检，行病理检查以明确是否存在SPI或CIN，病理阅片时出现挖空细胞即判断为SPI[2]。 1.3 统计学处理方法 采用SPSS13.0软件包，计量资料行t检验，计数资料行列联表x2检验。 2 结果 2.1 宫颈HPV-DNA亚型的感染情况 44例外阴CA患者中仅5例宫颈细胞HPV-DNA检测呈阴性（占11.36%），病理检查为慢性宫颈炎，而有39例检测均呈阳性（占88.64%），其中肉眼可识别的宫颈HPV病变有9例，组织活检为宫颈尖锐湿