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大鼠原位肝移植模型的手术技巧_临床医学论文.doc

大鼠原位肝移植模型的手术技巧_临床医学论文 大鼠原位肝移植模型的手术技巧_临床医学论文 作者:王振猛,唐乙,宋少华,陆智杰,王全兴,俞卫锋 【摘要】 目的 探讨建立稳定的大鼠原位肝移植模型的外科手术技巧,为研究肝脏缺血再灌注损伤提供技术支持。方法 110只雄性SD大鼠随机配对后分别作为供体和受体,通过改良Kamada“二袖套”法施行大鼠原位肝移植。结果 改良Kamada法建立大鼠原位肝移植模型共52例,7d 生存率88.5%,7例长期存活大于100 d。 结论 大鼠原位肝移植模型的建立需要极度的耐心和娴熟的手术技巧,模型的建立有助于研究肝脏缺血再灌注损伤,移植免疫及器官保存。 【关键词】 原位肝移植;动物模型;大鼠 Abstract: Objective To improve the operation technique for orthotopic liver transplantation in rats, and illustrate the hepatic ischemia-reperfusion injury in future study.Methods One hundred and ten male SD rat were randomly paired as donor and receptor and were performed with orthotopic liver transplantation by modified Kamada’s two cuffs technique.Results As a result, 88.5% of the 52 rats with orthotopic liver transplantation survived more than 7 days and 7 ones survived longer than 100 days. Conclusion Extreme patience and skillful surgical techniques are necessary for rat orthotopic liver transplantation model, which is helpful to the study on hepatic ischemia-reperfusion injury, transplantation immunity and organ preservation. Key words: orthotopic liver transplantation; animal model; rat Starzl于1963年首先为一先天性胆道闭锁的儿童施行肝脏移植手术后,肝移植术已逐渐成为各种急慢性肝功能衰竭的有效的治疗手段,但肝脏缺血再灌注损伤仍不可避免,并已成为移植肝功能不佳或原发性无功能的主要原因,在术后1周内需再次行肝移植的患者中移植肝无功能约占81%[1]。 大鼠肝脏移植模型是研究肝脏缺血再灌注损伤、移植免疫、器官保存等基础理论的理想模型,对于进一步探讨围术期肝脏缺血再灌注损伤具有重要的意义。目前国内关于大鼠肝移植模型建立的文章已比较多,本文主要从手术细节方面具体讨论手术技巧和需要注意的问题。 1 材料与方法 1.1 材料 供受体均采用封闭群SD雄性大鼠,购自第二军医大学实验动物中心,重200~250 g,实验室清洁级饲养,随机配对后以体重较轻者为供体。门静脉袖套采用内径2.2 mm,外径2.6 mm的套管鞘,袖套长约3 mm,下腔静脉袖套使用内径3.0 mm,外径3.6 mm 的聚乙烯奶品吸管,袖套长3 mm,袖套均留2 mm 柄部供夹持,以刻槽器在管壁上刻槽以防止打结时丝线滑脱。胆总管套管应用外径1 mm 的一次性硬膜外麻醉导管,长6 mm,两端修剪成斜面。显微器械购自上海手术器械厂。结扎线用5-0普通丝线,血管缝合线用7-0号丝线,均购自上海金环医疗用品厂。灌注及保存液均为4 ℃ 乳酸钠林格液,其中每ml灌注液中含肝素25 U,地塞米松20 μg;肝素化液为4 ℃ 生理盐水,每ml含肝素50 U。 1.2 手术方法 1.2.1 供体 按照改良Kamada法[2]行大鼠原位肝移植术。乙醚吸入麻醉成功后,腹腔内迅速注射苯巴比妥(50 mg/kg),大鼠取仰卧位,腹部大十字切口,剑突牵引,置腰垫,将肠袢移至腹腔外左侧,覆盖湿纱布,远离肝脏剪断肝镰状韧带、冠状韧带,游离并双结扎离断左膈下静脉。游离肝盘状乳头突表面韧带以充分暴露盘状乳头突。双结扎离断食管静脉,离断肝胃韧带,游离肝动脉并挂线待灌注后打结。分离胆道,距离左右肝管汇合部1.5 cm 处插管,结扎后远端剪断,留牵引线一根备用。暴露幽门静脉并挂线待灌

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