髓核细胞鉴定的研究进展.pdfVIP

登挂窆E型苤盍：!Q!堡生坚旦：筮!!鲞!塑』!Pi趔§!垡：垒P巫!!Q!垒：!!!!!：№! ·综述· 髓核细胞鉴定的研究进展 阳普山，王德利，刘子双一，吴剑宏，阮狄克 【关键词】椎间盘；干细胞；细胞分化；生物学鉴定法；组织工程；综述 394．26 【中图分类号】R 【文献标志码】A【文章编号】1672-2957(2014)02-0107-04 1 【DOI】doi：10．3969／j．issn．1672—2957．2014．02．01 目前髓核细胞尚无特异性细胞标记¨J，通常认 合多聚体、非聚合单体形成，而髓核组织内蛋白聚糖 为来源于髓核并表达Ⅱ型胶原、SOX-9和聚集糖胺则是以非聚合多糖蛋白单体、蛋白多糖簇构成，其内 聚糖的细胞即髓核细胞。仅以Ⅱ型胶原、SOX-9和缺乏明显的透明质酸轴丝。而加拿大学者Mwale 聚集糖胺聚糖来在定义髓核细胞显然是不足的，因 等四1通过定量检测细胞外基质蛋白聚糖与胶原纤维 为上述细胞标记无法鉴别髓核细胞与软骨细胞。干 含量，发现髓核与软骨细胞基质内蛋白聚糖和胶原的 细胞治疗椎间盘退行性疾病是目前的研究热点之 比值明显不同：髓核细胞其比值为25：1，软骨终板内 一【2j，精确鉴定髓核细胞在干细胞治疗椎间盘退变 该值仅为2：1。因此髓核细胞蛋白聚糖分子结构、蛋 的背景下具有重要意义日1。缺乏对髓核细胞相关 白聚糖和胶原的比值与软骨细胞的差异可作为髓核 特征的认识，阻碍了干细胞治疗为代表的髓核再生 细胞与软骨细胞的鉴别点之一。 策略的相关研究。本文将对髓核细胞鉴定相关研究 3 髓核细胞鉴定的相关细胞内因子 加以综述，以加深对髓核细胞特异性的认识，为椎间 盘退变的相关干细胞治疗的研究提供更好的髓核细 椎间盘的髓核细胞内处于一种低氧，高渗透压， 胞鉴定方法。 低营养的苛刻生存状态，为适应这样苛刻的生存环 境，髓核细胞内存在一些特殊的细胞因子，这些特殊 1 髓核细胞形态学鉴定 的细胞内因子可能作为髓核细胞的鉴定点。Rajpu— 细胞形态学方面：在普通2D培养条件下HJ，原 代髓核细胞需6～7d贴壁，初贴壁时呈短梭形、多 现：小鼠髓核细胞内的细胞低氧诱导因子-10t 角形，胞质向外伸突，然后突起逐渐伸长，经8— inducible (hypoxia 12d可达亚融合状态，后呈漩涡状的细胞团，胞质 1，GLUT．1)，间质金属蛋白 蛋白glucosetransporter 丰富，具有折光性。而纤维环细胞体外普通培养条 酶-2(matrix 件下与髓核细胞形态学较为相似，亦为梭形HJ。而 内较其周围的纤维环及软骨细胞有明显差异表达， 软骨细胞在普通培养条件下为椭圆形细胞∞』。有 提示以上细胞内因子可以作为髓核细胞鉴定的相关 研究表明髓核细胞形态学可随着培养条件的变化而 分子。Risbud等¨川通过免疫荧光显微技术及West— 发生改变，如髓核细胞在3D培养条件下细胞形态 学发生巨大变化，其由梭形细胞变为球形细胞¨J。 羊及人类髓核细胞恒态高表达HIF一1d。而软骨细 因此，仅凭细胞形态学对髓核细胞进行鉴别是不可 胞内HIF．1仅因子在正常氧分压条件(21％)下无明 靠的，需结合其他方法才能提高鉴定的可靠性。 显表达，但在低氧分压条件(2％)下可诱导该分子 2髓核细胞外基质的鉴定 表达的明显上调。因此该作者同样认为HIF一10t用