铝和谷氨酸脱氢酶反应体系中生物分子相互作用机制的研究.pdfVIP

广西师范大学学报(自然科学版) 2003年10月 GUANGXI JOURNAl，0FNORMAI，UNIVERSTTY 铝与谷氨酸脱氢酶反应体系中生物分子 相互作用机制的研究 杨小弟，毕树平 南京大学化学系．江苏南京210093 铝的有机配合物形态是研究环境和生物体系中铝的毒性、生物有效性和传输机理的关键．为了分析铝 对环境生物体中谷氨酸脱氢酶的酶促反应影响．我们分别研究该反应体系中的底物(。酬戊二酸和谷氨 上理解铝的毒理性及其对机体代谢的影响． 酶：谷氨酸脱氢酶 HOOCCH：CH2COCOOH+NH；+NADHHOOCCH，CH 2CH(NH (底物：a酮戊二酸) (还原型辅酶I) (底物：谷氨酸) (氧化型辅酶I) 在过去20年里，铝的形态分析都是依据操作手段来进行“组形态”(Group 5年多来分析技术的发展对铝的形态分析逐步达到了“单形态”(Individual 2000，72．1 自己的部分工作和国内外该领域最新进展，并依据IUPAC 453和Analyst 有机配合物形态的分析进展和生物学意义进行了综述． 为了研究铝(Ⅲ)与生命体中重要的有机分子n一酮戊二酸(aKG：H。I。)的作用机制，我们采用了电位 滴定、核磁共振、拉曼光谱和分子力学计算对酸性溶液中的反应体系的配位作用和互变异构进行了分析． 并采用电喷雾质谱以及固体和溶液核磁共振谱表征了浓溶液反应体系中的沉淀．来说明铝(Ⅲ)对a酮戊 二酸的催化脱羧的反应过程．获得如下实验结论：①配位作用：铝(Ⅲ)与n一酮戊二酸在酸性溶液中配位形 成沉淀；①影响因素：讨论了在相似条件下，有机酸(谷氨酸、草酰乙酸、柠檬酸、草酸、酒石酸)与A…和其 对该作用机制的影响．所得实验结论有助于进一步理解金属离子的催化脱羧反应的本质(电子转移和交替 极化)以及铝(Ⅲ)对生物体系中酶促反应的影响机制． 我仃】采用r电位滴定和核磁共振谱L1H．”【1，“。A1 [AlAH“，AlA+，AIAH，]的单核形态以及2：1 c()() 位形成的1：1[Al八+．A1AH。]配合物形态中存在三齿配位( 于理解Al一对转氨基作用的酶促反应中谷氨酸结合活性点位的抑制作用以及Al(；lu盐沉淀于脑内．引 起双螺旋纤维蛋白的异常磷酸化反应，最后形成神经原纤维缠结和老年斑 Al”与谷氨酸住酸性溶液中配 广西师范大学学报(自然科学版) 第21卷 位能力比a一酮戊二酸要弱，但与辅酶NAD+相当；这些结果都会影响到生物体中的转氨基作用和酶促反 应． 核核磁共振谱(1H，”C，”P，”A1NMR)所证实；③用二维核磁共振谱(1H，1H 多，所以溶剂(极性)对配体NAD+和配合物AI—NAD+的构象也存在很大的影响． 与铝(Ⅲ)的配位点位与NAD+的情况相似，配位作用主要发生在磷酸氧，并为1H，”C，”P，”AINMR谱所 证明；②在近中性溶液(pH6～7)和生理条件铝的浓度(10“～10 展开式构象的生理活性；③只有在过量酸如柠檬酸、草酸和酒石酸存在下，才能恢复铝tⅢ)对NADH活性 的影响． 采用电位滴定法研究了铝(Ⅲ)与重要的生物分子L一(+)抗坏血酸(VitC：HI，)在0．1tool／I，KCI 5 介质2j。c下和0．1mol／I．NaCI介质37。c下的配位作用．实验结果表明：在酸性溶液中AJ与v“c形 2氧原子可以与铝(Ⅲ)通过弱的配位键和水分子的氢键而发生作用． 配位的主要点位，()一l，O oNTHEEFFECTSOF