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不同PEG 分子量对包载羟基喜树碱的 PEG-PHDCA 纳米粒体内外行为的影响及其相关性的研究 施斌 方超 裴元英* 复旦大学药学院药剂教研室 上海200032 摘要 目的 探讨三种不同 PEG 分子量对包载羟基喜树碱的聚乙二醇化聚十六烷基氰基丙烯酸酯纳米 粒 HCPT-PEG-PHDCA-NP 的体内外行为的影响及其相关性 方法 采用了阴离子聚合法制备了三 种不同PEG 分子量PEG-PHDCA 采用乳化溶剂蒸发法制备了 HCPT-PEG-PHDCA-NP 研究了该NP 的形态 粒径 载药量 包封率 冷冻干燥工艺 体外释药特征及体内药动学参数 结果 载药量 体 外释药 体内药动学参数等与不同 PEG 分子量有关 本实验通过单因素实验和正交设计 得到最佳处 方和工艺 制得NP 粒径在50-200nm 之间 载药量最高可达1.8 体外释药实验表明 PEG-PHDCA 纳米粒的体外释药符合Higuchi 方程 其释药机理主要由扩散和溶蚀所控制 随着PEG 分子量的上升 其释药速率变快 体内药动学实验表明 三种载药纳米粒和HCPT 的血药浓度 时间曲线符合二室开放 药动学模型 PEG5000-PHDCA PEG2000-PHDCA PEG10000-PHDCA 纳米粒分别可延长HCPT 的消除半 衰期15.9 9.94 8.86 倍 其绝对生物利用度分别提高了24.5 8.4 6.2 倍 说明该类载药纳米粒具有 明显的长循环效果 结论 HCPT-PEG5000-PHDCA-NP 具有最佳的长循环效果 纳米粒体外性能的表征 对体内行为的预测极为重要 关键词 乳化溶剂蒸发法 药代动力学 羟基喜树碱 聚乙二醇化聚十六烷基氰基丙烯酸酯 羟基喜树碱 Hydroxycamptothecin HCPT 是喜树碱的衍生物之一 有选择性抑制DNA 拓扑异 构酶 (Topo )作用 该药物的半衰期短 需反复给药 故毒副作用大 脂溶性强 而制成水溶性钠盐 的抗癌活性降低 90%,故临床应用受到严格限制[1-2] 本项目选用聚乙二醇化聚十六烷基氰基丙烯酸酯 PEG-PHDCA 为载体材料 制备HCPT 的PEG PHDCA 隐形纳米胶束 使得药物能够较稳定长时 间地存在于血液循环体系中 可解决其水溶性差和稳定性差的制剂学问题 半衰期短的生物药剂学问题 并可能通过EPR 效应被动靶向肿瘤组织 进一步达到提高药效 降低毒性的目的 实验部分 1.仪器 药品与动物 ALPHA 2-4 冷冻干燥仪 10ATVP Shimadzu 高效液相色谱仪 Nicomp TM 380ZLS 粒度和zeta 电 位仪等 羟基喜树碱 上海紫杉新技术有限公司 单甲氧基聚乙二醇 MePEG Mr=2000 5000 均为sigma 公司产品 MePEG10000 由复旦大学高分子系提供 其他有机溶剂均用分析纯 动物 istar 大鼠, ,(250 50) ,上海中科院实验动物中心 2. PEG-PHDCA 材料的合成 对文献方法进行适当改进后 合成聚乙二醇化的聚十六烷基氰基乙酸酯[7-8] 3. HCPT-PEG-PHDCA 纳米粒的制备和表征 将适量的羟基喜树碱 PEG-PHDCA加入有机溶剂中溶解,水相中加入适量表面活性剂 在不断搅拌 中将有机相注入水相 一定功率的超声乳化一定时间 旋转蒸发除去有机溶剂 得半透明的胶体溶液 载药量 DL 和包封率 ER 的测定 本实验测定 ER 和 DL 的方法是将一定体积 V1 的 HCPT-PEG-PHDCA-NP 胶体溶液用HPLC 法直接测药物浓度C1 然后将同体积的胶体溶液超速冷冻离 心 4 14000r/min 离心 2min 小心吸取上层液 弃去药物微晶 上层液用中空超滤器除去水 将 底部的纳米粒冷冻干燥 干燥品用氯仿 甲醇 1 2 溶解定容成一定体积 V2 HPLC 法测定药物浓 度C2 ER=C *V / C *V *100% 2 2 1 1 DL=C *V /W *100% 2 2 NP