产OXA-23型碳青霉烯水解酶鲍曼不动杆菌基因的研究.pdfVIP

HCIM 论文汇编 CCCCLM CN一5 产OXA一23型碳青霉烯水解酶鲍曼不动杆菌基因研究 应春妹 汪雅萍上海第二医科大学附属仁济医院检验科200127 李菁菁刘智凯凌健华香港中文大学临床微生物系 不动杆菌是医院感染常见病原菌，该菌广泛存在于自然界、 OXA一23一B 医院及人体皮肤，为条件致病菌…。鲍曼不动杆菌主要引起医院获 得性肺炎、败血症、尿道感染、伤口感染、脑膜炎以及免疫受损，术 OXA-24-B 后病人感染。鲍曼不动杆菌对许多抗生素如B一内酰胺类、氨基糖 苷类、氟喹诺酮类等均有一定的耐药性，而碳青霉烯类抗生素对 不动杆菌仍有较好的抗菌活性口。但随着临床碳青霉烯类抗生素 的广泛应用，鲍曼不动杆菌对其耐药性亦日益增多[31。本实验收集 二，方法 我院对碳青霉烯类抗生素中敏或耐药鲍曼不动秆菌共12株，用 L抗菌药物最低抻菌浓度(MIC)检测用琼脂稀释法检测12 琼脂稀释法检测12株鲍曼不动杆菌对16种抗菌药物的耐药性，株鲍曼不动杆菌对16种抗生索的最低抑菌浓度[41。鲍曼不动杆菌 4|cfu／ 采用脉冲场凝胶电泳分析同源性，并对其所产碳青霉烯酶进行初 菌液用MIC一2000多点接种器接种于琼脂表面，接种量约10 步研究。 点，370c孵育18小时，以无菌落形成时抗菌药物最低浓度为 材料和方法 MIC。 一、材料 1试验菌株收集我院2002年8月一2003年8月临床分离 的亚胺培南、美罗培南中敏或耐药鲍曼不动杆菌共12株，均经生 35s，电压6v，在14℃电泳32h。 物梅里埃公司VitekGNI卡重新鉴定。8株来自痰标本、l株来自 脓液、1株来自腹腔引流液、1株来自静脉管、1株来自血液标本。 设计引物，采用煮沸法制备模板。PCR反应参数为94℃预变性 2．质控菌株大肠杆菌ATCC25922，大肠杆菌ATCC35218， 绿脓杆菌ATCC27853均由香港威尔斯亲王医院提供。 PCR产物用12％的琼脂糖凝胶电泳，溴化乙啶染色，紫外灯下观 察结果。 3抗生素阿米卡星(AMK)、庆大霉索(GEN)、替卡西林 结果 (TIC)、环丙沙星(cIP)、替卡西林一克拉维酸01C—CLA)、头孢他啶 1 12株鲍曼不动杆菌耐药状况12株鲍曼不动杆菌其中9 (CAZ)、头孢吡肟(CPE)、亚胺配南(IMP)、头孢哌酮(crP)、头孢哌酮一 株对亚胺培南耐药，3株中敏；6株对美罗培南耐药，6株中敏。12 舒巴坦(crP—SBT)、美罗配南(MEM)、复方新诺明(SMZ-TMP)、哌拉 株鲍曼不动杆菌对青霉素类、头孢菌素类、复方新诺明均耐药，对 西林(PIP)、哌拉西林一他唑巴坦(P1P-TAZ)、氮苄西林一舒巴坦 氟喹诺酮类和酶抑制剂复合物耐药率最低，仅2株对利氟沙星耐 (AMP-SBT)、利氟沙星(LEV)均由香港威尔斯亲王医院提供。 4 药，3株对哌拉西林／他唑巴坦和头孢哌酮／舒巴坦耐药。12株鲍 Biosciences公司 Apal限制性内切酶购于AmeIsham