放射自显影法研究钙在小鼠骨骼中的吸收与钙南对大鼠骨质疏松的药理作用.pdfVIP

放射自显影法研究钙在小鼠骨骼中的吸收及钙质 对大鼠骨质疏松的药理作用 中国康复研究中心(1姗)孙素元 中国药品生物制品检定所范玉明 中国协和医科大学 王振纲 摘要：本文报告：(一)采用ca一45放射白显影法研究了钙在小鼠骨骼中的吸收；(二)采用生 化指标、骨密度、骨生物力学性质监测，研究了钙对骨疏松太鼠的药理作用。 关键词：放身自显影法骨质疏松钙质 一、放射自显影法研究研究钙在小鼠骨骼中的吸收 1．放射性示踪剂的制备 取速溶珍珠粉(浙江东方巨生珍珠制品有限公司提供)碳酸钙+v。(市售)各20噶(以钙量计 算)，原子反应堆中利用钙ca一44(n，r)ca一45产生放射性核索，反应堆照射时，采用循环水冷却， 样品温度控制在50屯以下，以确保被照射物质不发生分解。经过适时“冷却”，衰变掉放射性杂质后， 将靶物用等量人工胃液(按中华人民共和国药典所示方法配制)溶解，待用。 2．实验动物 昆明种小鼠，雄性，体重18+29，由中 国药品生物制品检定所动物中心提供(质量合 格证号：京动管字[1996]第082号)，普通 鼠料喂养，自由进食，适应三天后进行实验。 3．实验方法 取上述lO只鼠随机分成两组，每组5只， 其中一组为逮溶珍珠粉，另一组为碳酸钙+ v。，另取空白对照组2只。 灌胃：将准备好的放射性溶液(速溶珍珠 粉和碳酸钙+v。)每种分成5等分，每份灌一 只小鼠，每日两次，5天内灌完，三天后断颈 处死。在暗室中，将小鼠紧贴在感光胶片上， 进行放射自显影，时间为48h。典型实验结 果：如底片l(图片1)，底片2(图片2)。结 果提示： 1．两种受试物中的钙均可被小鼠骨骼吸 收。 2．两种受试物相比，速溶珍珠粉中的钙 比碳酸钙+v。中的钙更易被小鼠骨骼吸收利 用。 二、钙质对大鼠骨质疏松的治疗作用 一14一 材料与方法 自由进食，饮用自来水。 药品：醋酸钙纯钙含量丝．9％，由烟台中策药业有限公司提供，批号960118。 活性钙纯钙含量51．4％，由汕头药厂提供。 分析方法：血清钙(ca)用甲基麝香草酚兰比色法；血清磷(P)用单一试剂法；血清碱性磷酸酶 盒均由北京化工厂临床试剂分厂提供。 (北京中国科学院40l所生产)；40lO型自动生化分析仪(北京)。 动物试验：取上述健康雄性大鼠70只，在乙醚麻醉下进行双测睾丸切除术，木后选用60只上述大 鼠，随机分为五组，每组12只，第一组为高剂量醋酸钙组，醋酸钙含量为1．266s／Kg；相当于纯钙 每天经口给予蒸馏水2nⅣ只，另取12只未手术的正常大鼠作为空白对照组。各组大鼠在末次给药后的 第40天，股动脉放血处死，采集股动脉血，分离血清供生化测定；剥离双测大鼠股骨，剔除软组织， 放人密封塑料袋中，低温冰箱储存，供骨密度及骨生物力学测定。 骨密度测定：用单光sD一10∞型骨矿物测定仪．测定股骨远端(O．18／I)及股骨颈处的骨密度， 单位为吕／cm2。 骨生物力学性能测定：采用长春非金属试验厂生产的wD—l型电子万能试验机，做股骨三点折断 挠度的函数关系，P为破坏性测试最大屈服点受力，Y与挠度，与材料的韧性呈正比，s为屈服或折断 所做的功；K斜率，与材料的刚度呈正比，在骨上显示钙化程度。 数据处理：所有数据表示为x±sD，均值比较均采用两组小样本均数的“t一检测”。 结果与讨论 文献报道，切除幼年太鼠睾丸，可建造肾虚症，除表现全身性状外，并可出现骨质疏松，用该方法 制成的骨质疏松模型已被广泛应用于抗骨质疏松中药的研究。本文在切除大鼠睾丸韵同时，喂饲低钙饲 料，加速了骨质琉松的形成。从表l的试验结果可以看出，模型组大鼠血钙水平明显低于空白对照组 (P0．01)，提示切除睾丸40天后，出现了钙代谢异常，而醋酸钙及活性钙的试验治疗组，其血钙水平 均显著高于模型组，与模型组比较都有显著性差异。说明醋酸钙能预防和阻止去睾丸致的血钙下降，提 高血钙水平，其强度以等量纯钙比较研究表明，醋酸钙明显优于活性钙(见表1)。 表l醋酸钙对切除大鼠若丸所致骨质疏松血清钙、磷的影响{x±sD 注：与模型组比较 +P0．∞，一