溶胶-凝胶固定化酶生物传感器测定有机磷农药地研究.pdfVIP

第二届全国环境化学学术报告会论文集 溶胶一凝胶固定化酶生物传感器测定有机磷农药的研究 高慧丽康天放王小庆 北京工业大学环境与能源学院，北京，100022 f一? ，’芬{) ，H，，。 摘要6闶溶胶一凝胶法将乙酰胆碱酯醇固定在醋酸纤维膜上，再将酶膜固定在钴酞菁修饰的玻碳电极上， 制备了可应用于有机磷农药测定的生物传感嚣，并对生物传感器的制备条件进行了优化．＼采用安培法对有 ／ x1 机磷农荮进4i-检m,l，对于对硫磷、辛硫磷和氧化乐果的检测限分别为2．0o～mol／L、1．4×10“mol／L和 1．I×101mol／L． 关键词：己酰胆碱酯酶，溶胶一凝胶法，生物件感嚣，有机磷农药 V l 。x／ 0 前言 目前，测定有机磷农药的传统方法有色谱法等，但是这些方法操作繁琐，分析周期长， 样品处理复杂，不适合对农药残留进行现场的快速检测．而固定化酶生物传感器能有效的 克服这种不足．在固定酶的各种方法中，溶胶一凝胶(Sol—gel)材料由于具有制备条件温和、 孔径可调、热稳定性好以及化学惰性等优点而被用来固定各种生物活性物质…．包埋于 Sol—gel中的生物活性物质可以保持其结构、活性和功能，而且小分子还可以通过Sol—gel 的孔道与生物活性物质接触．本文研制了Sol—gel固定化乙酰胆碱酯酶(ACHE)生物传感器， 优化了实验条件，并将该传感器应用于有机磷农药的检测． 1 实验部分 1 1试剂与仪器 化学试剂公司．所有实验均在CHl660A电化学工作站(上海辰华仪器公司)上进行，以生 物传感器作工作电极，饱和甘汞电极和铂片电极分别作参比电极和对电极． 1 2乙酰胆碱脂酶生物传感器的制备 聚四氨基钴酞菁(p—CoTAPc)修饰电极按我们前文方法制各。1．在25mL烧杯中，依次 uL 1：20 加入ImLTEOS、0．2mL乙醇、30HCI、0．5mL蒸馏水，放入超声波清洗器中于室 温下超声振荡0．5h，使其形成均匀澄清的溶胶，然后于室温下放置2—3h，使用前用 照一定体积比混合．充分搅拌均匀，用微量注射器将一定体积的混合液均匀滴涂于直径为 pH7．4的磷酸盐缓 6mm的醋酸纤维膜表面，于4℃下放置24h．将上述酶膜置于0．1mol／L 冲溶液中浸泡lOmin后取出，用0型圈将其固定于p-CoTAPc修饰的玻碳电极表面．制备好 的AChE生物传感器置于冰箱(4℃)中备用． 1．3测定方法 7．4)中， AsCh的0．1mol／L磷酸盐缓冲溶液(pH 将生物传感器浸入含有0．5mmol／L 埘|7 第二届全国环境化学学术报告会论文集 搅拌10 min，采用+0．6V作为工作电位，在静止的溶液中记录所产生的稳态电流丘m在 另一份同样浓度的AsCh溶液中加入一定量的农药溶液，搅拌10min，测定稳态电流(t。。)． 根据下式计算百分抑制率(^)： ^=[(t。。一L。。)／五。-]×100％ 2 结果与讨论 2．1p-CoTAPc修饰电极对硫代胆碱的电催化氧化 以AsCh作为底物，在AChE的催化作用下，发生以下反应： 乙酰硫代胆碱+H20——◆硫代胆碱+乙酸 所生成的硫代胆碱(cHa)小’一cHz—c}12一sH中的巯基可以被电化学氧化成二硫基，电流信 号大小随溶液中硫代胆碱浓度的增加而增大．硫代胆碱在p-CoTAPc修饰的电极上的伏安 行为迄今尚未见文献报道，本文利用循环伏安法研究了硫代胆碱在裸玻碳电极和p-CoTAPc 修饰的玻碳电极上的伏安行为，发现在含5×101