东乡绿壳蛋鸡ESR1基因多态性与产蛋性皂的关联分析.pdfVIP

东乡绿壳蛋鸡E脓J基因多态懈蛋I：生能的关蝴 季华员，刘林秀，韦启鹏，武艳平，谢明贵，康昭风，宋琼莉 借眙士，黄江南，李海琴，唐维国，陈介文，谢金防一 (江西省农业科学院畜牧兽医研究所，江西南昌 330200) 1 引言 雌激素受体(EsR)是一种与特异激素应答DNA元件相结合的激活转录因子，目前，国内外对猪邵R基因多态 性的研究比较多，而在禽类的研究很少，关于东乡绿壳蛋鸡雕尺J基因多态性与产蛋性能关联性研究尚未见报道。 绿壳蛋鸡E船J基因进行多态性分析，并与产蛋性能进行关联性分析，以便为东乡绿壳蛋鸡的品种选育和标记辅助 选择提供理论依据。 2材料与方法 300日龄东乡绿壳蛋鸡130只，翅下静脉采血2mL，采用常规的饱和酚／氯仿抽提鸡血DNA，TE溶解后用 Nanodrop一1000全波长紫外／可见光扫描分光光度计检测DNA浓度及质量。取部分样品稀释至20ng／此作为工 作液备用。通过网站NcBI、ucsc、ENsEMBL下载鸡EsRJ基因组序列、mRNA序列(登录号x03805)，根据所下 载的序列采用primer5．o设计5对引物。使用5对引物进行PcR扩增获得邵尺J基因部分序列。将扩增产物电泳 后割取目的条带用NucleospinPcR纯化试剂盒纯化，纯化后的样品委托上海生工生物工程有限公司测序。在已 鉴别的多态位点中选择exon4 乡绿壳蛋鸡中开展基因多态性检测。采用DNAstar软件进行序列分析，鉴别sNP位点，判定基因型。利用软件 PoPGEN计算基因型频率、等位基因频率和多态信息含量(PIc)。用sPAss17．o统计分析软件对不同基因型与产 蛋量进行单因素方差分析。 3结果 通过5对引物扩增、PcR产物纯化后直接测序法嬲RJ基因共搜寻到7个sNPs，其中第一内含子上5个，第4外 显子和第8外显子上各1个。经x2适合性检验，EsRl两个多态位点(exon4 c．267Tc和Exon8 知，exon4 c．315Tc多态位点各基因型间300日龄平均产蛋量差异不显著(Po．05)。 4讨论 鸡的产蛋性能是重要的经济性状，但其遗传力较低，直接选择收效甚微，随着生物技术的飞速发展，越来越多 的学者开始寻找可用于标记辅助选择的分子标记。关联性分析结果表明exon4c．267Tc多态位点中，TT型和 0．01)，Tc型和cc型300日龄平均产蛋量也接近显著(P=0．06)；exon8c．315Tc多态位点各基因型间300日龄平 均产蛋量差异不显著(Po．05)。本研究中exon4c．267Tc位点各基因型间与300日龄产蛋量存在一定关联性。 但仅凭关联性分析结果还不能肯定东乡绿壳蛋鸡E躲J基因exon4c．267Tc多态性能影响300日龄产蛋量，还需 扩大试验样本进一步检测和验证。 关键词：东乡绿壳蛋鸡；耶尺J基因；多态性；产蛋性能；关联分析 }基金项目：本研究由江西省农业科学院青年基金(2008010)，江西省农业科学院博士启动基金(2叭1cBs008)课题资助。 }}通讯作者，E—mail：五ejfl66@163．com 一213一