沙苑子中沙苑子苷的HPLC法含量测定的研究.pdfVIP

沙苑子中沙苑子苷的HPLC法含量测定研究’ 张建军1 闰兴丽2 张玉杰2 张秋菊1 曾风英2 翟永松2 (1北京中医药大学基础医学院北京100029；2北京中医药大学中药学院北京100102) R．Br)的干燥成熟种子。分布于东北、西北及湖 沙苑子为豆科植物扁茎黄芪(Astragalus∞m口lanatus 南。本品始载于《神农本草经》，味甘性温，归肝、肾经，具有温补肝肾、固轻、缩尿、明目等功效。用于肾虚腰 痛、遗精早泄、自浊滞下、小便余沥、眩晕目眩等病症。从20世纪80年代起不少学者对其性状鉴定、化学成 分、药理作用等进行了较为集中的研究，其中对于沙苑子的化学成化的研究已经取得了相当的成果。但迄今 还没有关于沙苑子质量标准的研究报道，《中国药典》中沙苑子项下亦未收载含量测定方法。作为国家重点 科技攻关项目——沙苑子标准品研究的一部分，本实验应用HPLC，以自制的沙苑子苷为指标成分进行定量 方法研究，建立了沙苑子药材中沙苑子苷的含量测定方法；并依法对全国20个不同产地的沙苑子进行含量 测定。本研究首次制定了沙苑子中沙苑子苷的含量测定方法，为沙苑子的质量控制规范化、标准化提供了依 据。 1仪器与材料 1．1仪器Waters高效液相色谱仪(Model510)，ZORBAXEXTEND—C18(4．6×250mm 5ttnl)色谱柱，超 声波清洗机。 1．2材料流动相用水为双蒸水，乙腈为色谱纯，其余为分析纯，沙苑子苷对照品自制，为供含量测定用，纯 度为99．1％。 2实验条件的确定 本实验采用高效液相进行含量测定，应符合《中国药典)2000年版一部附录Ⅵ．D高效液相色谱法测定 的有关规定。 2．1色谱条件与系统适应性试验用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；乙腈一水一磷酸(20：80：0．2)为流 动相；检测波长为267nm；流速为1．0ml／min；室温。理论扳数按沙苑子苷峰计算应不低于2000。 2．2对照品纯度检查取沙苑子苷对照品适量，加50％乙醇制成每lml台0．5mg的溶液，超声溶解，摇匀， 取20ta注入液相色谱仪，计算含量为99．1％。 2．3最佳波长选择取以上沙苑子苷对照品溶液，加甲醇稀释，在200—400nm之间进行紫外扫描，在 匀，分别精密吸取4，8，12，16，2唯l注入液相色谱仪，测定峰面积，绘制标准曲线，表明沙苑子苷在0．086。 2．5样品脱脂时间的选择沙苑子为种子类药材，其中含较多的脂溶性成分，干扰测定。本实验用石油醚 3h。 醇含量最高，故采用60％乙醇超声提取30min。 3实验方法与结果 3．1对照品溶液的制备精密称取沙苑子苷对照品，加50％乙醇制成每lml含0．3mE的溶液，超声溶解， 再稀释成每lml含0．0075rag的溶液，摇匀，即得。 99—929—0l一29 ·国家重点科技项目中药现代化研究课题一沙苑子标准品研究NO 114 醇25ml，密塞，超声提取30min，滤过，取续滤液，取得。 3．3测定法分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各20fjl，注人液相色谱仪，测定，即得。 2906212．2909461，RSD为O．62％。结果表明，其在48h内基本稳定。 好，结果见表1。 裹1精密度实验ln=5) 二 垄壁至!￡立 !：!塑 !：竺! !：!垫 !：!塑 一—!二塑! 峰面积 3004581 3037981 3063158 3027157 3048992 现性良好，结果要见表2。 衰2重现性实验结果(n=5) 并按以下公式计算回收率：回收率=(实测沙苑子苷总量一样品中沙苑子苷含量)肋Ⅱ人沙苑子苷的最× 100％，测定结果见表3。结果表明本法具有良好的回收率。 表3回收辜测定结果 学 ：筹 嚣未 呦c％， 曼 翌!占2