功能化溶胶-凝胶乳腺癌免疫电极地研究.pdfVIP

广西师范大学学报(自然科学版) 2003年10月 JOURNAI，OFGUANGXINORMALUNIVERSITY 功能化溶胶一凝胶乳腺癌免疫电极的研究 梁汝萍“2，邱建丁”，邹小勇1，蔡沛祥“ l中…大学化学与化学工程学院，广东广州510275；2萍乡高等专科学校化工系．江曲萍乡3370％ 出，为功能团的引入和多种生物分子的键连固化开辟了更为广阔的新天地．我们以N卢氨乙基7氨阿基 电极表面，然后结合交联技术，通过双功能试剂戊二醛将乳腺癌抗体(Ab)固定于功能膜上，制备成用于检 测CA】53的免疫电极 1实验部分 h， 将90,uI．AEAPTMS，30,ul。TMOS，400,ul，水和20,u1．0．1tool／i，HCl混匀，室温下超声振荡2 使其形成均匀澄清的溶胶，然后室温放置3d．将3pI，上述溶胶储备液滴涂于按文献[2]预处理过的铂盘 电极表面，4。C于态放置12 h后，浸人体积分数为2．5％的戊二醛中1h，取出用PBS充分清洗，室温晾 5 干，再浸入300,ug／I，CAl3抗体标准溶液中，4。C干态放置2～3h，清洗后置于0．2％BSA中1h以封 闭未反应完全的醛基．将样品滴于免疫电极表面室温培育3 2结果与讨论 2．1 免疫电极修饰过程的红外光谱表征 将免疫电极制备过程中先后得到的solgel膜、sol—gel／GA膜和sol 析，结果如图1所示．940 1 036 500～3300CFII CIIl一处出现的吸收峰对应于sl一()si键的不对称伸缩振动．图1(a)中于31处出 现两个吸收峰，于1672cIn。1处出现一个吸收峰；图l(b)中以上三处吸收峰消失，于2720CITI1左右和 1 730gin1处出现了两个新的吸收峰，对应于醛基的特征吸收．而图1(c)中醛基的特征吸收峰消失，3500 ～330ucm1出现了 NH!的特征吸收．表明CAIj3抗体通过双功能试剂戊‘醛组装到了sot妊c【上 2．2免疫电极的电化学行为 采用循环伏安法t(、、’)对免疫电极逐层组装过程的电化学行为进行了研究．在一0l～I．0V扫描范 围内．sol gel修饰电报在PBS中于0．7、’左右出现氨基的氧化峰；当solgel与戊_二醛结合后，solgel／ 38 (；A修饰电报上该氧化峰消失、于0V和0．16V左右出现一对醛基的氧化还原峰．表明通过醛基与氢 基金项目：广东省自然科学基金资助项目(011105) 84(}3857 educn 作者简介：蔡沛祥(194l一)，男．教授．研究方向：电分析化学电话：020 7；E—mall“esyshj(a，ZNU 广西师范大学学报(自然科学版) 第21卷 原峰电流随抗体浓度的增加和反应时间的延长逐渐降低，甚至消失，表明随着CAl5—3抗体与醛基之间反 应的进行，戊二醛的醛基逐渐被反应完全而失去了电活性．由此也进一步证实了CAl5 3抗体在氨基化 soI—geJ膜上的交联组装过程． 8c霉11E鬯巴一 图1 CAl5-3抗体固定化过程的FT一1R光谱 2．3免疫电极对CAl5—3的电位响应特性 修饰前体中氨基的引入，为抗体在氨基化sol gel膜上的交联固化提供了条件．Ab通过双功能试剂戊 二醛以手臂的形式与