特异选择性分子烙印固定相形成条件地研究.pdfVIP

LC-087 特异选择性分子烙印固定相形成条件的研究 苏立强 刘学良王俊德 商振华 齐《齐哈尔大学，齐齐哈尔 161006) (中科院大连化学物理研究所，大连116011) 分子烙印固定相是近几年来发展起来的一种新型色谱固定相，由于其专有特异选择性而备受 人们的关注。目前己报道的这种固定相可以分为共价型和非共价型两大类。共价型分子烙印固定 相主要用于氨基酸及其衍生物、搪类及其衍生物、芳香酮、二醛、三醛以及幽醇类物质等化合物 的分离分析;而非共价型分子烙印固定相成功地用于分析氨基酸及其衍生物、维生素、二胺、 肤、刀一肾上腺素阻抑剂等化合物的分离分析[[1l 在共价型分子烙印固定相制备过程中，功能单体与烙印分子通过正向可逆反应发生共价作 用，形成带有双键的烙印分子衍生物，再与交联剂交联聚合后，通过在反向可逆反应下将烙印分 子从分子烙印聚合物中解离出来，形成对烙印分子的 “记忆”空穴2-〔51。在非共价型分子烙印 中，功能单体与烙印分子通过包括氢键作用、离子作用或疏水作用等在内的非共价作用力，自动 形成具有一定稳定性的复合物，与交联剂交联固化，然后采用适当的溶剂将烙印分子抽提出来， 形成分子烙印聚合物。 一般认为分子烙印固定相对溶质的分离与环糊精手性分离有相似的机制，即只有溶质与固定 相之间存在特殊的作用位点，才能够达到选择性分离的目的。烙印分子与功能单体间也存在着匹 配性，并非所有结构的分子都可以通过烙印的形式制备相应的色谱固定相。本文从分子结构的角 度出发，探讨形成非共价型分子烙印固定相的必要条件，并以咖啡因和茶碱为例，通过实验进一 步说明。 1 实验部分 1.1仪器和试剂 HPLC仪:星达LP-05C泵，SOMA紫外检测器，江申色谱工作站。 咖啡因 (ACROSORGANICS,USA)，经重结晶纯化后备用;茶碱 东〔京化成工业株式会社)， 甲基丙烯酸 (M朋 北京化工厂)，乙二酸二甲基丙烯酸醋 (EDMA。工业级，上海珊瑚化工厂)，以 减压蒸馏的方法去除阻聚剂;偶氮二异丁精 (AIBN，北京化工厂)，抓仿 (分析纯)，使用前也 需去除阻聚剂。 1.2分子烙印固定相的制备 (1) 以茶碱为烙印分子的固定相制备:将茶碱0.18g、甲基丙烯酸0.35g溶解于适量抓仿 中，放置过夜，使烙印分子与功能单体充分作用，加入交联剂EDMA4g、引发剂AIBNO.04g，充分 溶解后.超声处理 20min，充氮脱气交替进行多次，密封.在 0C.366nm紫外光照射下反应 48h.得到坚硬的固体聚合物。粉碎、过0.042mm分样筛;以甲醉加乙酸(体积比为二90:10)为溶剂 索式提取20h，去除烙印分子，留下与烙印分子在空间结构上完全匹配，含有与烙印分子专一结 合功能基的 “记忆”空穴，进一步用乙睛反复沉降以除去细小颗粒，得到粒径小于30)xm的无定形 颗粒。聚合物分散于乙睛中，用乙醉作顶替剂，在10MPa压力下，装入150mmx4mm的HPLC柱中， 备用 (柱I)。 (2) 以咖啡因为烙印分子的固定相制备:与以茶碱为烙印分子制备聚合物的方法类似，将 咖啡因0.2g、甲荃丙烯酸0.5g溶解解于适量体积的氮仿中，进一步按 1.2(1)节的步骤制取咖 啡因烙印分子固定相，装柱备用 (柱n)。 2 结果与讨论 分别使用分子烙印固定相柱 (I)和柱 (11〕进行实际样品色谱分析，结果见图1,图2. 日 I2 t/min 图 ， 烙印茶碱分子柱色谱分析 l咖啡因;;2.茶碱。 t/min 图2烙印咖啡因分子柱色谱分析 1咖啡因:2.茶碱口 由图 1可见，在茶碱烙印色谱柱上，咖啡因出峰很快，而且峰很窄、对称:而茶碱出峰较 慢，色谱峰有明显的拖尾:两峰很好分离。说明该柱对茶碱有特殊作用，即在该柱上茶碱分子被 成功烙印。由图2可见，在咖啡因烙印色谱柱上，咖啡因