β-环糊精修饰胶束电动毛细管色谱法分离大黄中有效成分地研究.pdfVIP

2001年增刊 分析试脸室 Vai.20.Suppl 2001年 II月 ChineseJournalofAnalysisLaboratory 2佣 1·日 p一环糊精修饰胶束电动毛细管色谱法分离大黄中有效浦分的研究 袁悼斌，尚小玉 (中国科学技术大学研究生院应化所，北京100039) 摘 要:首次用p一环栩精修饰的胶束电动毛#1管色讲法分离大黄中5种有效成分.提冲溶液为确胶监(pff-10.38)含 20moot/LSDS和10mnot/Lp-CD,10-15%v八的甲醉.5种组分在23min内全却分离. 关钮词:大黄;0-g栩精修娜胶束电动毛细管色语;含童All定;SDS 大黄是我国常用中药，具有泻下、抗菌、抗 响。随着SDS浓度的增大，5种组分的迁移时间 病毒、止血、止痛、抗肿瘤及抗突变等作用“2·，。 变长，以大黄素甲醚、大黄酚和大黄素最为明显， 大黄的主要成分是葱醒类及其衍生物，包括大黄 大黄酸和芦荟大黄素的变化幅度较小.这与它们 素、大黄酚、大黄酸、芦荟一大黄素、大黄素甲醚 的亲油性和自身电泳淌度有关。亲油性越大，随 和它们的葡萄糖贰等。对其活性成分分离测定的 着SDS浓度的增加在胶束相中的溶解度增大，导 常用方法是TLC和HPLC-1等。近几年来，胶束 致迁移时间变长。 电动毛细管色谱法[sl微乳胶毛细管色谱法O[:等 2.3p-CD浓度的影晌 方法应用到大黄的分离测定中。本文首次把p_-UF 环糊精 (CD)作为手性选择剂，广泛的用于 糊精 ((CD)修饰的胶束电动毛细管色谱法用于分 分析领域。本文选用了p-CD为手性选择剂.随着 离大黄中5种有效成分，结果令人满惫。 p-CD浓度的增大。各物质的迁移时间缩短.这是 1仪器与试剂 由于5种组分与p-CD形成了包结物，与原组分相 实验在北京新技术所1229型AnalyserHPCE 比，包结物的体积变大，而且不同物质与S-CD形 上进行。未涂层的熔融石英毛细管，购于河北永 成的包结物也不同，所以导致迁移时间变短.当 年光纤厂.内径为501Am，有效长度50cm。柱上 (1-c。浓度在10-20mmo1/L之间时，分离效率最好， 紫外检测 (254nm),。巨压14kV，电进样5S, 浓度再大将会降低分辨率。 磷酸盐缓冲溶液由NazHPO,和KH2PO,(M/30) 3.4有机溶剂的形晌 配制。十二烷墓硫酸钠 (SDS)购自军事医学科学 选用甲醇、无水乙醉为溶剂，考察了有机溶 院药材供应站，p-CD购自华北地区特种化学试剂 剂对分离的影响。结果得出甲醉的效果比无水乙 开发中心。无水乙醉、甲醉均为分析纯试剂。 醉好。当甲醇的加入I为工015}vb时，效果最 实验前，用。.1mot/LnaOH冲洗管壁10min, 好。有机溶剂的加入，降低了EOF，扩宽了分析 然后用二次水冲洗 10min,最后用缓冲溶液冲洗 时间窗口，使分辨率得到提高，且峰形得到改善。 5min. 5种组分的电泳图如图1所示. 2结果与讨论 2.1pH对分离的影晌 对含IOnmol/LSDS和1Onmol/Lp-CD的磷酸 盐缓冲溶液考察了不同pH值下的分离情况.在 pH=7.9410.38范围内考察了班值对迁移时间的 影响.5种成分的迁移时间随pH值增大而降低. DH值增大，电渗流 (EOF)增大，导致分离时间 1芦签大黄索2，润成3大闷盼4浏日牌徽S大黄素 窗口缩短。各组分迁移时间变小.在pH=10.38 时，5种组分分离效果最好，且迁移时间最短。 4结 论 2.2SDS浓度的影晌