一氧化氮对棉花叶片中磷酸化蛋白质组学的影响与分析.pdfVIP

一氧化氮对棉花叶片中磷酸化蛋白质组学的影响和分析 孟艳艳2* 范术丽1*宋美珍1庞朝友1魏恒玲1刘 记 1 冯常辉2张胜昔2**喻树迅1** 1.中国农业科学院棉花研究所/棉花生物学国家重点实验室，河南 安阳 455000; 2.湖北省农业科学院经济作物研究所，湖北 武汉 430064 摘要：近年来，一氧化氮(Nitricoxide，NO)作为一个相对稳定并且具有广泛作用的重要信号分子已 成为国际研究的热点。众多研究表明，NO在植物体内能够参与多种生理生化活动，包括诱导抗病相 关基因的表达、参与程序性细胞死亡以及植物的成熟和衰老等。为研究NO对棉花生长发育的影响， 前期试验中，作者用NO的供体SNP(硝普钠，Sodiumnitroprusside)溶液处理棉花幼苗，发现外施 NO可显著延缓棉花子叶的衰老。同时，还对不同浓度SNP处理后的棉花真叶进行了蛋白质组分 析。结果表明，利用非标记定量法分析不同浓度的NO对棉花叶片蛋白质组的影响，一共得到了166 个差异表达蛋白，这些蛋白按照功能分为14类，己知定位的蛋白分布在叶绿体、高尔基体、细胞质和 线粒体中。信号通路分析发现，NO广泛地参与细胞的各种生理活动，并且对光合作用、氧化磷酸化 和蛋白质加工过程产生了明显的调控作用。 与基因组不同，蛋白质的丰度、结构、稳定性、亚细胞定位及与其他生物大分子的相互作用时刻处 于动态变化之中，而蛋白质的这些动态变化主要是通过翻译后修饰来调控。鉴于蛋白质的磷酸化修 饰在生命活动中所具有的重要作用，探索和发现新的磷酸化蛋白、磷酸化位点以及对其功能的调控作 用已经成为研究人员关注的热点。因此本研究在原有基础上，以中棉所10为材料，利用iTRAQ这 一磷酸化修饰定量分析技术获得叶片中受NO调控的磷酸化蛋白质组信息。结果表明，共得到了 2291条磷酸化肽段，去除冗余后，共得到了1315条磷酸化肽段。其中，发生单个位点磷酸化的肽段 占总数的72.6％，双位点的占13.0％，3个位点的占0.4％，只有0.1％的肽段发生了4个位点的磷酸 化。1315条磷酸化肽段中共包含了1528个磷酸化位点，其中磷酸化发生在丝氨酸上的占89.7％，苏 氨酸占9.5％，酪氨酸占0.8％。对非冗余的磷酸化肽段进行注释，发现其分布于1020条磷酸化蛋白 序列上。对这些肽段进一步定量分析，则分布于347条蛋白上的402条磷酸化肽段达到了1.5倍的 显著变化水平。对显著变化的磷酸化蛋白进行KEGG分析，结果显示NO调控的磷酸化蛋白广泛地 参与了植物抗病性、光合作用、Splicesome、RNAtransport、mRNAsuveillance以及对生物钟系统的 调控。本研究首次展开棉花中NO磷酸化蛋白组学的研究，为进一步了解和探讨NO的作用机理及 其在棉花生长发育中的作用奠定了良好的理论基础和科学依据。 关键词：棉花；一氧化氮；磷酸化蛋白质组学