鱼藤酮离体生物合成植物体选择研究.pdfVIP

、 V01．19 第19卷增刊 热带作物学报 supplement !!!!生!!旦 兰旦!塑曼!兰!竺旦垦塑垒生Q曼!垦Q旦!竺垒生竺垦竺!墨 堕!!：!!!! 鱼藤酮离体生物合成植物体的选择研究 曾鑫年谷文祥谢建军 (华南农业大学 广州 510642) 摘要通过比较测定同一立地条件下的几种鱼藤和灰毛豆植物中鱼藤酮含量、生物活性和高含量植 物体的离体培养适合性．选择具有较高目的次生物质生物合成能力的种质。结果表明．西非灰毛豆叶 具有很强的生物活性．对鱼的致死时间为O．09h，含鱼藤酮3．709／lOOg干重．且易于离体培养产生愈 伤组织，诱导率100％，培养30d其鲜重增加7220倍。初步测定结果表明，西非灰毛豆叶愈伤组织培 养物具有一定的生物活性，是鱼藤酮离体生物合成的优良植物材料。 关键词鱼藤酮离体生物合成鱼藤灰毛豆 Q343，6 中图法分类号$482．39 鱼藤酮是优良的植物源杀虫剂，防治果树、蔬菜、茶叶、花卉和粮食作物上的数百种害虫及 蚊、蝇等卫生害虫有良好效果，特别是近年在防治抗性害虫小菜蛾上发挥了重要作用o“1。鱼藤 酮不仅杀虫谱广，作用方式多样，作用机制特异，而且对哺乳动物低毒，对害虫天敌和农作物安 全，害虫不易产生抗药性，使用后对农产品品质无不良影响，无环境污染，是害虫综合治理上较理 想的杀虫剂。我国50年代已有鱼藤酮制剂的工厂化生产和使用。由于鱼藤酮为结构复杂的较大 分子化合物．难以人工合成。目前市场上鱼藤酮来源主要是通过栽培鱼藤根提取获得，占用大量 可耕地，且生长时间长，导致生产成本过大，在推广应用时受到一定限制。利用组织或细胞培养技 术以生物合成途径生产鱼藤酮有其独特的优势和意义。本文报道供鱼藤酮生物合成离体培养用 植物体的选择研究结果。 1材料与方法 l，l供试植物 毛鱼藤[1)erriselliptica(Roxb．)Benth．]；粤东鱼藤(D．haceiHemsl．)；白花鱼藤(D． alborubraHemsl．)；西非灰毛豆(TephrosiavogeliiHook．f．)；白灰毛豆(丁．candidaDC．)均采自 华南农业大学昆虫毒理室杀虫植物标本园。 1…2离体培养。 “ 在无菌条件下，将经0．5％(有效氯)次氯酸钠溶液消毒25rain的供试植物外植体接入MS +2 rig／mL2，4～D十1P．g／mL 国家自然科学基金(N029701I)和广东省自然科学基金(N0970027)资助课题 收稿日期：1098—09—30 增刊 曾鑫年等：鱼藤酮离体生物合成植物体的选择研究 75 组织的诱导和生长情况，并测量生长量。 1．3鱼藤酮含量的测定 Gira— 过滤后，滤液供试。从校园内池塘中捕获长约lcm的食蚊鱼[Gambusiaaffinis(Baird)et 死时间，以此判断其生物活性。 丙酮在索氏提取器中回流抽提10h，然后将提取液中丙酮减压蒸干，用无水乙醇溶解，过滤后定 于300nm波长处测定其吸光度(ABS)。根据标准工作直线回归方程．计算试样中鱼藤酮含量。 2结果与分析 2．1离体培养外植体的适合性 据本室以往的研究结果，鱼藤酮含量高且有较高生物活性的植物种类主要有豆科中的鱼藤 属植物和灰叶属植物“’3’51。由于鱼藤酮类物质主要存在于鱼藤植物的根部和灰叶植物的叶部， 笔者以根、叶为外植体进行了培养适合性试验。 表l 毛鱼藤和西非灰毛豆愈伤组织的诱导和生长量 从表1可见，叶是离体培养的最佳外檀体材料，极容易诱导出愈伤组织．诱导率为100％，而 根则明显比叶要差，诱导率低于20％。观察各处理愈伤组织的生长情况发现，根培养需经15d以 上才在较粗壮幼根切口边缘产生少量白色愈伤细胞，并很快变褐．生长缓慢；叶培养约2d开始 出现叶面扭曲，约7d