大鼠黑质密部alpha4烟碱受体免疫电镜地研究.pdfVIP

电子显微学报J．Chin．Electr．Microsc．Soc 17(4)t399～4001 998年 399 刊、桂媛侍继忠张开宁斌 (中国医科大学组织学胚胎学教研室，沈阳110001) 黑质密部(substantia nigrapars (银环蛇突触后神经毒素)结合的位置在黑质密部。免疫组织化学的证据提示娜亚型存在于 SNc“’3“3。细胞外记录已经证明了，SNc内的多巴胺神经元对烟碱激动剂的反应表现为放电率增 加，这种反应能被双氢一p一刺桐酊和美加明(盐酸一3一甲基氨基异樟脑烷)阻断。烟碱的作用是 否是在SNc神经元突触后的受体上，还是在释放兴奋性神经递质终末的突触前受体上，这个问 题仍然值得探讨。SNc含有胆碱能神经终末，它起源于大脑脚脑桥神经核，当刺激作用到这些胆 碱能输入纤维时，由于活化烟碱和毒蕈碱受体，在SNc多巴胺神经元内可见兴奋性突触后电位。 而有关药理学或者烟碱受体调节这个兴奋过程的组成还不清楚。 虽然SNc神经元存在烟碱受体的表达，但不清楚这些受体亚型是如何分布在这些神经元的 膜上。为了确定哪个受体亚型来调节这种反应，我们已经检查了alpha4亚型在多巴胺神经元内 的分布(应用光、电镜免疫组化方法)，现将免疫电镜内容报导如下。 材料和方法 脏灌注：先将lOOml含有肝素的0．1mol 醛的0．1mol PBS 进行处理后，再用单克隆抗体mAB 切片进行OsO．后固定1h，然后漂洗、常规脱水、环氧树脂包埋、制备超薄切片，再用醋酸铀染色 2h。在对照组，不加第一抗体，其余步骤同上。最后均于电镜下观察拍照。 结果 透射电镜下可见实验组：在突触前部的突触前膜部位的胞浆内，含有许多突触小泡(大部分 是圆形，时而形状和大小是多形性的)、线粒体、微丝及微管等。在突触后部的突触后膜(树突膜) 比突触前膜厚，其上可见密度增高的致密物附着，即为所标记的a；烟碱突触后受体亚型(图1)， 而且在突触后膜部位的胞浆内含有大量的微管、神经丝、线粒体及滑面内质网等。对照组：因为未 加第一抗体，所以无反应产物显示(图2)。 讨论 由上述结果可知，烟碱通过作用突触后受体，使大部分SNc神经元产生膜去极化。烟碱反应 并且是在这些神经元树突上突触后的高致密度处。 因此，从放射自显影、电生理、生化及免疫电镜研究表明：黑质、纹状体和中脑边缘多巴胺系 统是由烟碱和乙酰胆碱所激活，并作用在神经元胞体和终末水平。提示了烟碱受体广泛的基因表 达构成中枢神经系统的重要兴奋系统。目前，已经有关于烟碱缓解帕金森氏病运动症状的报导。 电子显微学报J．Chin．Electr．Microsc．Soc． 400 17(4)：399～4001998年 烟碱对多巴胺神经元保持一种活化作用，这对治疗是有益的。同时也可以想象到这就是在吸烟人 群比在不吸烟人群中极少患帕金森氏病的原因”3。 参考文献 et [1]W8daE a1．J．Comp．Neur01．，1989，284(2)。314—335· PBSeta1．Br．Res．，1988，348(1)：355～358． [2]Ciarke et r3]DeltoroED a1．J．Comp．Neuro|，1994，349(3)：325--342· cta1．J．Neurosci．，1991·11(1)：287--297· [4]SehuIzDW PJ eta1．J．Neurosci·，1988，8(3)。3395--3404- [5]Whiting 图1 实验组树突处的突触后膜可见被标记的高致密物(箭头示)，突触小泡(s．V．) 位于相对侧的突触前膜内。M：线粒体F：微管、微丝s：滑面内质网。 图2 对照组低倍镜下来显示出反碰产物。