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中国农业科学 2009,42(1):55-63
Scientia Agricultura Sinica doi: 10.3864/j.issn.0578-1752.2009.01.007
金荞麦二氢黄酮醇4-还原酶基因(FdDFR1)的克隆及序列分析
1,2 1,2 2,3 1,2 2 2 2 2
刘光德 ,雷兴华 ,祝钦泷 ,钟光驰 ,郭铁英 ,李艳冬 ,眭顺照 ,李名扬
1 2 3
(重庆市农业学校,重庆 401329 ; 西南大学花卉研究所,重庆 400716 ; 华南农业大学生命科学学院,广州 510642 )
摘要: 【目的】克隆金荞麦二氢黄酮醇4-还原酶基因(FdDFR1 ),分析其序列特征。【方法】利用同源克隆
的原理,采用RACE结合cDNA 文库筛选的方法,从金荞麦cDNA文库中克隆DFR基因(FdDFR1 );对其序列进行生
物信息学分析和 Southern 杂交检测。【结果】克隆到一个 DFR 蛋白基因(FdDFR1 ),通过 Southern 杂交分析,
推测在金荞麦基因组中 DFR 基因是 1~2 个基因的小家族,FdDFR1 是单拷贝基因;FdDFR1 基因编码一个长 341 个
氨基酸的蛋白质,在 N 端存在一个 NADP 结合位点“VTGASGFVGSWLVMRLLEHGY”,还存在一个底物结合特异性决定
的氨基酸基序“TVNVEEKQKPVYDETCWSDVDFCRRV”。【结论】首次从金荞麦中克隆到类黄酮代谢的中期关键酶基因
(
FdDFR1 ),它具有DFR同源基因的典型特征。
关键词:金荞麦;二氢黄酮醇4-还原酶;克隆;类黄酮
Cloning and Sequence Analysis of a DFR Gene from
Fagopyrum dibotrys (D.Don) Hara
1,2 1,2 2,3 1,2 2
LIU Guang-de , LEI Xing-hua , ZHU Qin-long , ZHONG Guang-chi , GUO Tie-ying ,
2 2 2
LI Yan-dong , SUI Shun-zhao , LI Ming-yang
1 2
( Chongqing Agricultural School, Chongqing 401329; Institute of Ornamental Plants Research, Southwest University, Chongqing
400716; 3College of Life Science, South China Agricultural University, Guangzhou 510642)
Abstract: 【Objective 】 This work was aimed to investigate the sequence characteristics of a DFR gene from Fagopyrum
dibotrys (D.Don) Hara. 【Method 】According
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