基于ITS2条形码的桔梗药材遗传多样性研究.pdfVIP

2015年3月 第『40卷第6期 恩 ．蠡蠹 Vo1．40，No．6lMarch，2015 基于 ITS2条形码 的桔梗药材遗传多样性研究 吴波 ，李永波 ，饶建波 ，曾金祥 ，朱继孝 ，方香香 ，刘福青 ， 李洪泽4，韩风雨4，钟国跃 (1．江西中医药大学 中药资源与民族药研究中心，江西 南昌330004； 2．江西中医药大学 江西省中药种质资源工程技术研究中心，江西 南昌330004； 3．内蒙古蒙吉药业科技有限责任公司，内蒙古 赤峰 024000； 4．内蒙古天奇中蒙制药股份有限公司，内蒙古 赤峰024000) [摘要] 目的：利用 ITs2条形码探讨不同产地桔梗的遗传多样性。方法：提取桔梗药材DNA，PCR扩增基于进化速率较快的 DNA内部转录间隔区2(ITS2)序列并测序，采用 Clustal比对分析不 同产地桔梗 ITS2序列 ，应用 MEGA5．05软件计算种 内 Kimura2-parameter(K2一P)遗传距离，以桔梗科党参属植物党参的ITS2序列为外展值，运用邻接法(neighbor-joiningmethod)构 建桔梗系统进化树。结果：试验所用全部样本的K2一P遗传距离为0～0．930，相同地区来源的样本 K2一P遗传距离分布于0— 0．178，不同地区来源的样本K2-P遗传距离为0．735～0．930；分析结果表明，桔梗种 内遗传变异程度巨大，与其地理位置显著 相关。结论：ITS2条形码适用于桔梗种内遗传多样性研究，为进一步拓展DNA条形码技术的应用提供了参考。 [关键词] 桔梗；ITS2条形码；遗传多样性 Studyongeneticpolymorphism ofPa／tycodongrandiflorum based on barcodingofITS2 WUBo ，LIYong-be，RAOJiang—be ，ZENGJin．xiang ，ZHUJi—xiao ，FANGXiang—xiang ， LIU Fu-qings LIHong—ze ，HAN Feng-yu ，ZHONG Guo·yue’ ， (1．ResearchCenterofNaturalResoursesofChineseMedicinalMaterialsandEthnicMedciine，JiangxiUniversityofChinese Medicine ，Nanchang330004，China ；2．ChineseMedicine Germplasm ResourceEngineering TechnologyResearchCenter， JiangxiUniversityofTraditionalChineseMedciine，Nanchang330004，China； 3．InnerMongoliaMengjiPharmaceuticalTechnologyCo．，Ltd．，Chfieng024000，China； 4．nInerMongoliaTianqiHanMongoliaPharmaceutcialCo．，Ltd．，Chfieng024000，China) [Abstract] Objective：ITS2ofDNAbarcodingwasusedtostudygeneticpolymorphismofPlatycodongrandfliorum．Method：Total genomicDNAwasisolatedfromP．grandfliorum．PCRwasusedtoamplifiedtheregionofinternaltranscribedspacer2(ITS2)，and PCR productsweresequenced．ThesequencesofITS2werena