禽传染性支缺管炎病毒四川分离株M基因的克隆与真核表达载体构建.pdfVIP

2003年增刊(第30卷总第154期 试验研究 矿叶参牡 禽传染性支气管炎瞒毒 扬帆，王红宁．李春，昊琦，周 生 悃川农业大学动物科技学院，四川雅安625014 3 中国分类号：s858 文献标识码：A 文章编号：1001—896412003)增刊一0019一01 摘要膜蛋白是禽传染-『生支气管是病毒的主要结构蛋白。可能存在着具有重要免疫作用的抗原决定簇．能诱导细胞介导的免疫 因M基因并插入到P(；EM—T栽体中．获得重组质粒PGEMM，将重组质粒中的克隆片段进行序列测定厦分析。时PGEM—M进行 DNAst盯软件将IBv 9l6％～98 8％，氨基酸序列的同源率为916％一哪6％。糖基化住点的增加和减少对M蛋白的抗原性产生根走的影响。在M蛋白近N 端台有两个糖基化仁点，第一个跨膜疏水区距离亲水匹大约20十氨基酸。sAIBwlM基因核苷酸、氨基酸进化关系可以看出， 变异较大．常规疫苗不能产生完垒保护力。在IBv的免疫保护机制申，细胞免疫起着关键的作用，近年来一些研克者已经进行了 后有40％的鸡可耐过强毒的攻击，说明s1基目在体内获得了表选并使鸡产生了一定的免疫力。刘思国等将鸡传染-『生支气管炎HB 保护率为40％，表明N蛋白介导的细胞免疫在抗感染中发挥了作用。现在的DNA疫苗研究主要集中在免疫原性较高的N基因和s 基因，时免疫原性较低的M基因的研究，国内未见报道二国外有报道M蚤白也能刺激机体产生低水平的抗体，M蛋白上可能存在着 具有重要免疫作用的抗原决定簇，蕾研究将为进一步研究M基因的免疫原性厦其在IBv中的作甩基础材料。 关键词：鸡传染性支气管荑病毒；M基固；真核袁选质粒 and RecombinaIlt Cloning，Sequencing Eukaryatic of Co砸tmctiong ExpreI粥ion，Vector MembraneGene ofInfectionsBronchitisVirusIsolatedinSichuan．China YANGF蚴，w^xe chull，wuzHOu Hn”旷n”g．Ll Ql she“g 曲m矿or^…““”ll…Ⅳ“nr^np^肾，S^u帆^F”“furdfm¨1…m S￡f^“唧y一62如』4，c^LMj Abstract：Aof wem tothe 0fM ofIBV pair 8pec讯opnmcrsdesi98刊alld8y11thesized ln a‘‘cordl“g P“blisheds。queIlceg。ne 【；㈣Bank of cDNA RT—PCRhumvlralRNA s【mln．and M学enewasobtalnedby o{IBVSAIBWJfunherclonedmtoPGEM坷 VectoⅢndl(1entl6ed PCR叽ddoubIe The was the。o盯e(’‘plasmid d‘ges山n sul)一clonediIno be— hy M旷ne