鹅MTP基因组织表达特性与填饲对其表达的影响.pdfVIP

四J|I省畜牧兽医学会2010年学术年会 鹅MTP基因组织表达特性及填饲对其表达的影响术 叶健强-t2王继文1 摘要本研究以朗德鹩和四川白鹅为研究材料，采用RT—PCR方法对鹅MTP基因在不同组织、不 同的发育阶段时的肝脏和小肠组织中的表达特性进行了研究，并研究了填饲对肝脏与小肠组织中MTP基 因表达的影响。结果显示，在检测的8种组织中MTP在10周龄时只在肝脏、小肠和脑组织中有表达；鹅 MTP基因在肝脏和小肠中的表达量随着周龄的增加呈现出逐步上升的趋势；填饲引起肝组织MTP基因表 达水平降低，而使小肠组织M1’P基因表达水平升高。 关键词鹅；MTP；基因表达；填饲 微粒体甘油三酯转运蛋白(Microsomaltransfer triglyeeride 基和分子量为55一kDa的二硫化合物异构酶(protein ester，CE)和卵 low 物体内肝细胞和小肠细胞中形成富含TG的极低密度脂蛋白(verydensity B，apoB)翻译 和转移到(endoplasmic 转运到apoB上，并使其构象折叠恰当，进而可组装形成一个含有中性脂质中心的脂蛋白颗粒，以便将TG 向外周组织分泌。在体内，由MTP基因是参与VLDL和CM或门静脉微粒组装和分泌过程中的必须因 Lu等和Fares等在小鼠的胚胎发育过程中发 子。近年来，随着对MTP基因的组织表达和功能研究，Song 因在心脏组织中同样也有较高地表达。目前，对鹅MTP基因组织表达特性的研究尚属空白，本研究以朗 德鹅(Anseranser)和四川白鹅(Anser eygnoides)作为试验材料，旨在研究鹅MTP基因组织表达特性以及填 饲对肝脏和小肠组织MTP基因表达的影响，为研究MTP在鹅肝脏VLDL—TG生成与分泌过程中的作用机 理提供参考。 1材料与方法 }基金项目：国家科技支撑计划项目(2008BADB2808和2006BADl4806)资助 作者简介：叶健强(1979一)，男，硕士，助理研究员，现在四川省畜牧科学研究院工作，yjq3240247@126．corn 通讯作者：王继文(1964-)，男，教授，博导，wjw2886166@163．corn 第一篇遗传育种 1．1试验动物和饲养管理 选用朗德鹅(Anseranser)和四川白鹅(Anser cygnoides)同批孵化，分别饲养于同一条件下，饲养要求： 填期只加精料并且供给量逐渐过渡为自由采食，14周龄时，将每品种鹅群随机分为填饲组和对照组。对 照组，继续饲喂生长鹅饲料，自由采食；填饲组，每日机器填饲5次，填饲期2周，其饲料配合：煮黄玉米、 3％的鹅油和1．5％食盐等(ME-3370KCal，CP=9．O％)。 1．2样品采集 肌、腿肌、皮脂、腹脂、脑和心脏等组织样各5克。将所取的各组织样，先用DEPC处理水洗去表面血液，然 后用剪刀迅速剪成50—100mg大小的组织块，放人2ml冻存管内并作好标记后存于液氮中速冻，以备总 RNA提取，速冻后的样品于一70。C保存，以备各组织总RNA的抽提。 1．3试验方法 kit方法提取总RNA；然后将总RNA在加有溴乙锭的1％的 1．3．1总RNA的提取、检测与纯化按Beyozol I和用乙 测定总RNA的浓度和纯度，参照Liang的方法除去总RNA中的DNA，并用酚／氯仿法除去DNase 醇沉淀总RNA，干燥后用加DEPC水稀释成1ug／u，一70℃贮存。 1．3．2 RNA cDNA合成按AMVRC