壳聚糖固定化糖化酶地研究.pdfVIP

壳聚搪固定化糖化酶的研究 ‘ 王家东 侯红萍 ‘’ (山西农业大学食品科学与工程学院 太谷 030801) 摘 要:以亮聚枪为载体，采用包埋法固定糖化醉，研究了pH和沮度对固定化箱化醉活力 的影响。固定化醉活力回收为65%。固定化醉的欢适作用温度为 “℃，比游离酶的最适温度提 高了5C;最适pH为4.6，比浒离酶的录适pH提高了0.5个pH单位。固定化抬化膝和游离醉 的米氏常数分别为1.0线和0,29%. 关健词:壳聚枪;枪化醉;固定化 StudiesonImmobilizationofGlucoamylaseWithChitosan WangJiadong HouHongping (CollegeofFoodScienceEngineeringinShanxiAgriculturalUniversityTaigu 030801) Abstract;Withtheencapsulationofchitosan,glucoamylasewasimmobilized.Theeffectsof pHandtemperatureonimmobilizedglucoamylasewerestudied.Theresultsshowedthattheactivity recoverywas650o，theoptimumtemperatureofimmobilizedglucoamylasewas65C，5Chigher thanthatoffreeglucoamylase(60C)，theoptimumpHofimmobilizedglucoamylasewas4.6， 0.5unithigherthanthatoffreeglucoamylase(4.1).TheMichealisconstantKmofimmobilized glucoamylaseandfreeglucoamylasewere1.0%and0.29写respectively. Keywords;chitosan;glucoamylase;immobilization 壳聚糖 (Chitosan)是甲壳素 (Chitin)的脱乙酞化产物，因而又称为脱乙酞甲壳素、 甲壳胺，化学名称是1,4-2-氨基一2一脱氧渭-D-葡聚糖。甲壳素存在于虾、蟹等甲壳动物的甲 壳中，还存在于细菌、昆虫、藻类和高等植物的细胞壁中，分布极其广泛，是世界上仅次于 纤维素的第二大类天然高分子化合物，年生物合成量达数十亿吨。壳聚糖具有良好的机械性 能、稳定的化学性质，同时又易通过接枝而改性，再加上其来源丰富，无毒，成本低廉，制 备简单，是一种很有开发前景的固定化载体[4,51 葡萄糖淀粉酶 (E.C.3.2.1.3)，系统名为淀粉a-1,4-葡聚糖葡糖水解酶，俗称糖化 酶。糖化酶主要的用途是作为淀粉糖化剂，广泛用于食品发酵、酿酒、调味品、葡萄糖制造 等工业中。但由于天然酶稳定性差、易失活、不能重复使用，并且反应后混人产品，纯化困 ， 基金项目:山西省教育厅 (2002030),山西省科技厅 (041030), 通讯作者:侯红萍 (1965-)，副教授，主要从事食品及发醉工程方面的教学和科研。Email;Urping)sohu.corn. 608 难 代价昂贵，故而限制了其在工业中更为广泛的应用。因此，将酶进行一定的改造，例 如 将其固定化，可克服游离酶的缺点，使其成为更适合工业生产的新型酶制剂闭。 本试验用壳聚糖作为载体，采用包埋法对糖化酶进行了固定，并对温度、pH等因素对 固定化酶的影响进行了探讨。 1材料与方法 1.1 材料 葡萄糖 (淀粉酶糖化酶):无锡杰能科生物工程有限公司 (50000U/g). 壳聚糖 (脱乙酸度妻90.0%,豁度0.1Pas):上海佰奥生物科技有限公司。 可溶性淀粉 (分析纯):成都市彭县丽春化学厂。 其他试剂均为国产分析纯。 1.2 方法 1.2.1 糖化酶活力测定 用斐林试剂快速滴定法测定生成的葡萄糖含量。酶活力单位为一定温度和一定pH下， 每小时生成lmg葡萄糖所需的酶量。 1.2.2 固定化糖化酶的制备 用1%醋酸溶液配制浓度为30g/L的壳聚糖溶液，然后