串珠镰刀菌素对鸡血清白介素2含量的影响.pdfVIP

第6届家畜内科学学术研讨会论文集 串珠镰刀菌素对鸡血清白介素2含量的影响 王凯．杨丽梅。黄庆敏。刘为民．蒲文瑁 (佛山科学技术学院。广东佛山．528231) 摘要：从广东某饲料厂所用玉米E分离到串珠镰刀菌。并将该菌株接种玉米面进行产毒培养，培养物采用乙腈一水(95：5) 提薅滓瑚剞莨了了菌素(MON)。用提取的MON列邹菇淀阡再引生试验，固框|夹jC灞晤鹞黻吸阳司掷IsA)测定试验酒洫-清中白介．紊 2(Ⅱ广2)自垤嚏。结果表明：MON对鸡有毒营f{．J习，鸡血清中自介襄_2含量比对照组降旧和如．01)。 关健词：串珠镰刀菌素；鸡；白介素-2；免疫功能 在全球范围内，串珠镰刀菌是污染玉米等粮食作物的主要真菌，能产生多种毒素并给人类和动物造 培养物中分离到的一种真菌毒素。该毒素在自然界分布广泛，目前已知有十余种镰刀菌可产生MON，最 高产毒量达33．79／Icg。研究表明，MON对人和动物有强烈的毒性，并以心血管系统损害为特征。 MON化学名称为3一羟基环丁一3一烯一l，2二酮，在自然界通常以钠盐或钾盐的形式存在，MON为淡 黄色针状结晶，易溶于水和甲醇，不溶于二氯甲烷和三氯甲烷。可由十多种镰刀菌产生，这些镰刀菌在自然 界分布广泛，主要引起麦穗、谷粒及玉米等霉变，并能在燕麦、大豆、高粱、大麦、小米、小麦及土壤中 生长。自然存在MON主要污染玉米等粮食作物，MON对动物有较强的毒性作用，主要作用于增殖活跃的 细胞，如肝、脾、心肌、骨骼肌和软骨细胞等。抑制细胞蛋白质DNA合成，干扰细胞分裂增殖，对生物膜 通透性和各种酶活性有明显影响，同时引起机体过氧化损伤。动物MON中毒的症状主要表现为进行性 肌无力、呼吸困难、共济失调、全身紫绀、昏迷直到死亡。动物的特征性损害是心血管系统。小鸡表 现为发生腹水，肠系膜肿胀、出血，心脏肥尢心肌细胞变性坏死，心肌线粒体增多、肿胀。 广东省地处我国华南地区，常年气候温暖湿润，非常适合霉菌的生长，因此霉菌广泛存在并大量 污染粮食及饲料，对人畜健康构成很大的危害。2001年冬季广东省曾经发生销售被黄曲霉毒素污染的 毒大米事件，当时在社会上造成较坏的影响，已经引起卫生部门的重视。但作为饲料使用的玉米等谷 物受到霉菌污染后却未能引起足够的重视。由于广东的气候因素以及近年来作为饲料用玉米一些主产 区(河南、山东、安徽等)也在玉米收获季节遇到潮湿多雨天气，使得广东市场上作为饲料使用的玉 米的质量难以保证，经常会见到有不同程度霉变的玉米作为饲料原料使用，动物采食后出现了中毒现 象，很多猪场、禽场发生中毒事件，造成了较大的经济损失。 随着集约化养殖的发展，使得近年来，很多畜牧养殖场的疾病多呈复杂化，往往是多种疾病共同 感染，特别是病毒性疾病的发生逐年增多，且很多情况下发生免疫失败。当然造成这种情况的原因是 多方面的，但霉菌是否发挥作用尚未有人作过报道。因此笔者开展本试验，兹在通过测定鸡血清中白 介素2的含量，研究MON是否对鸡的免疫机能是否产生影响。 1．材料与方法 1．1材料 串珠镰刀菌：从广州某饲料厂原料玉米中分离的串珠镰刀菌作为本实验产毒菌株(分离方法另文 报道)。 1．2方法 1．2．I串珠镰刀菌的培养 第6届家畜内科学学术研讨会论文集 将试验菌株接种于琼脂培养基培养2天，待菌株大量生长后，再接种于灭菌玉米粉中培养．每2509 ℃培养lO天，转40C培养7天，再转25℃培养10天． 1．2．2串珠镰刀菌素的提取与纯化 经过27天的培养，选择串珠镰刀菌生长良好的锥形瓶(生长良好的串珠镰刀菌的瓶壁为紫红色．玉米粉 trd乙腈：水 滤弃去=氯甲烷，再加150ha二氯甲烷振荡15rain，同样弃去二氯甲烷。然后向样品中JJn．100 rain，过滤，收嶷滤液50rid于250 rain，待分层后 @5：5)振荡30 m1分液漏斗中。加入同体积的正己烷振摇2 C水浴 弃去正己烷层，将乙