水稻基腐细菌毒素的分离纯化、性质和生物学作用.pdfVIP

微生物学报ActaMicrobiologicaSinica 48(11)：1499~1506；4November2008 ISSN0001-·6209；CN11--1995／Q http：／／journals．im．ac．cn 水稻基腐细菌毒素的分离纯化、性质和生物学作用 刘琼光，罗建军，何雪霞，王振中 (华南农业大学资源环境学院，广州 510642) 摘要：【目的】水稻基腐细菌毒素迄今未见报道。毒素是病原微生物重要的致病因子之一，毒素的分 离纯化是研究病菌毒素功能和作用的前提和基础。【方法】通过几种层析柱的多次层析分离及对水稻 幼苗的生物活性跟踪测定，分离纯化水稻基腐细菌毒素；采用化学及生物化学方法，研究毒素的性 质及生物学作用。【结果】获得了水稻基腐细菌毒素的一个成分 T，，该成分为黄色固体 ，溶于甲醇、 正丁醇、水和甲酸；不溶于三氯甲烷、乙酸乙酯；微溶于丙酮，是非糖类和非蛋白质类物质，对紫 外线敏感。毒素具有抑制水稻生根、使水稻秧苗萎蔫和对烟草细胞坏死的作用。高浓度毒素抑制水 稻、玉米、番茄和烟草种子萌发，低浓度毒素则具有促进根、芽生长的作用。毒素对来自5个属的 10种植物病原细菌具有抑菌活性，同时具有诱导水稻 PAL和POD活性，且对抗病品种 128的POD 和PAL诱导活性均高于感病品种特籼 13。【结论】首次建立了水稻基腐细菌毒素的分离纯化方法。 该毒素具有抑制水稻幼根生长、导致秧苗萎蔫、引起烟草细胞坏死、抑制植物病原细菌和诱导水稻 防卫酶活性等生物学作用。 关键词：水稻基腐细菌；毒素；分离纯化；生物作用 中图分类号：Q93 文献标识码 ：A 文章编号 ：0001—6209(2008)11—1499—08 毒素(Toxin)是病原微生物产生的与病程密切相关 对植物病原微生物毒素的研究，能够更深入了解 的一类重要致病因子。一些植物病原细菌能产生一种或 寄主与病原菌互作中的生理学、生物化学、遗传学和 多种与致病相关的毒素 ，包括 ：丁香假单胞菌 分子生物等各方面f2]，同时毒素也具有广泛的应用前 (Pseudomonassyringae)、甘蔗白纹病菌 (Xanthomonas 景 3【]。人们在弄清毒素结构的基础上，可以合成与毒 albilineans)、水稻 白叶枯病菌(Xanthomonasoryzae 素相拮抗的化学物质进行病害防治4『；用毒素作为选 pv．oryzae)、甘蓝黑腐病菌(Xanthomonascampestris)、梨 择压力可筛选抗病品种或对植物进行抗性鉴定；用毒 火疫 病 菌 (Erwinia amylovora)、根 癌 土 壤 杆 菌 素对某些种子的萌发具有促进或抑制作用可将其进 (Agrobacteriumtumefaciens)、密执安棒杆菌 (Clavibacter 一 步开发为作物的促生剂或化学抑制剂5『；非寄主专 michiganense)、青枯病菌(Ralstoniasolanacearum)、大豆 化性毒素，可望进一步研究开发为生物除草剂和抗生 根瘤菌 (Rhizobiumjaponicum)等，已经定名的植物 素l6】。细菌毒素也可用于病害抗性工程的靶标。 病原细菌毒素有 1O多种，均为非寄主专化性毒素， 由菊欧氏杆菌玉米致病变种 (Erwiniachrysan． 引起寄主产生萎蔫、褪绿、水渍状、畸形等症状，其 themipv．zeae)引起的水稻基腐病，是近 20年来水 化学类别包括胞外多糖 、有机酸、聚酮类化合物 、多 稻上重要的细菌病害之一，在东南亚许多国家都有发 肽、糖肽等…。 生，成为水稻高产稳产的严重障碍，目前对该细菌的 基金项目：广东省攻关项 目(E99032) 通讯作者。Tel：+86—20E-mail：zzwarlg@scau．edu．cn 作者简介：刘琼光(1964一)，男，江西吉安人，副教授，博士，研究方向为植物细菌学。E-mail：qgliu@scau